[發明專利]一種紅花藥材高效液相色譜指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜無效

申請號：	201210482555.5	申請日：	2012-11-23
公開（公告）號：	CN102944625A	公開（公告）日：	2013-02-27
發明（設計）人：	秦緒江;單鈺毓;賽春梅;劉文亮;曲林;凌雪宇;李殿明	申請（專利權）人：	哈藥集團中藥二廠
主分類號：	G01N30/02	分類號：	G01N30/02
代理公司：	哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109	代理人：	高會會
地址：	150078 黑龍***	國省代碼：	黑龍江;23
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種紅花藥材高效色譜指紋圖譜建立方法及其標準
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及中藥材指紋圖譜的建立方法，尤其是紅花藥材高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜的建立方法，以及由此方法所得到的紅花藥材標準指紋圖譜，屬于藥物分析技術領域。

背景技術

紅花為菊科植物紅花的花。紅花為一年生草本，我國東北、華北、西北及山東、浙江、貴州、四川、西藏等地廣泛栽培。紅花性溫，味辛，活血通經、散瘀止痛。用于經閉、痛經、惡露不行、癥瘕痞塊、跌打損傷。古人常有於血在體內時，常加紅花一小把。紗布包煮開可用一天兩次泡腳，適用各種靜脈曲張，末梢神經炎，血液循環不好，腿腳麻木或青紫等淤血癥。紅花中成分比較復雜，含有紅色的和黃色的色素：紅花甙、前紅花甙、紅花黃色素A及B、紅花明甙A。又含多酚類成分：綠原酸、加啡酸、兒茶酚、焦性兒茶酚、多巴。還含揮發性成分八十余種，以及紅花多糖等。由于受產地、氣候和生態環境等的影響，不同紅花藥材所含的成分也存在著一定差異。《中國藥典》對紅花藥材的質量控制僅限于紅花黃色素A和山奈素含量的測定，不能系統、完整地反映紅花的內在質量。要控制紅花及其成方制劑功效，就不能只針對其中1、2個化學成分，必須對它的物質群整體予以控制。

中藥指紋圖譜特指中藥材或中成藥經光譜或色譜等現代分析技術得到的中藥各組分群體共有特征的圖譜或圖象。目前指紋圖譜已成為國內外公認的鑒別中藥品種和評價中藥質量的最有效手段之一。

中藥指紋圖譜經過了數十年的研究，使用了包括紫外、紅外、氣相、高效液相、薄層、核磁共振、掃描電子顯微鏡、計算機圖像分析、電泳技術、同功酶分析法、分子生物學技術、聚類分析技術等許多現代分析測試手段，為中藥的物質鑒定和成分分析積累了大量的數據。但從中藥全面質量控制的角度看，還遠未達到有效地反映和控制中藥的整體質量的目的。高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜在國際上容易獲得認可，包括美國、英國、法國、加拿大、德國、日本和印度在內的許多國家更愿意接受HPLC指紋圖譜。而且，目前還沒有紅花藥材的指紋圖譜。

現有的紅花藥材質量控制方法，存在質量控制技術的不足的缺陷。

發明內容

本發明的目的是提供一種紅花藥材指紋圖譜的建立方法。

本發明的一種紅花藥材高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：

一、供試品溶液的制備：稱取紅花藥材粉末，置于具塞容器中，按質量體積比為1g：100~300mL的比例將紅花藥材粉末與水混合均勻，在室溫條件下，超聲震蕩45min，取上清液用微孔濾膜過濾，收集濾液作為供試品溶液；

二、指紋圖譜的制作：將步驟一得到的供試品溶液注入高效液相色譜儀，以質量百分含量為0.2％磷酸水溶液為A相，乙腈為B相進行梯度洗脫；

其中，高效液相色譜條件為：

色譜柱填料Phenomenex?C18，規格為250×4.6mm，5μm；柱溫為25℃~35℃；流動相為B相乙腈和A相質量百分含量為0.1～0.2％磷酸水溶液，流速0.8~1.2mL/min，檢測波長370nm，進樣量20μL；

在此條件下分析供試品溶液，得到紅花藥材的指紋圖譜。

本發明采用紅花藥材高效液相色譜指紋圖譜的建立方法得到的紅花藥材的指紋圖譜。

本發明包含以下有益效果：

(1)將紅花藥材作為一個整體對待，通過比較其共有峰可以找出不同藥材之間的細微差異；