[發明專利]一種保加利亞乳桿菌增菌培養基及其制備方法

有效

• 申請號: 201210470652.2
• 申請日: 2012-11-19
• 公開（公告）號: CN102952772A
• 公開（公告）日: 2013-03-06
• 發明（設計）人: 陳合;李串娜;舒國偉;王勇
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/225
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 汪人和

技術領域

本發明屬于益生菌制品制備技術領域，涉及一種益生菌培養基，特別涉及一種保加利亞乳桿菌增菌培養基及其制備方法。

背景技術

近年來，隨著酸奶制作技術的發展，乳酸菌發酵劑的制備方法也得到了相應的提高。決定酸奶品質的一個關鍵因素是發酵劑，國內的酸奶生產企業大多采用傳統的液體發酵劑。而傳統的液體發酵劑存在周期長、接種量大、操作繁瑣、活菌數低(10⁷-10⁸cfu/mL)；菌種易污染、退化、變異等眾多弊端，因此直投式的凍干發酵劑成為酸奶發酵劑發展的主要方向。

保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌是酸奶生產中常用的菌種。要得到高活菌數且高活力的酸奶直投式發酵劑，首先必須篩選適合乳酸菌大量生長的增菌培養基。目前，大都采用MRS作為基礎培養基，然后配合其他的生長因子來培養保加利亞乳桿菌。但此培養基價格昂貴，成分復雜，制作繁瑣，不利于工業化生產。因此，選擇價格低廉且活菌數高的適合保加利亞乳桿菌生長的增殖培養基是非常必要的。

呂加平等研究了保加利亞乳桿菌的增菌培養基。結果表明，1g魚肉蛋白胨、2g乳糖、1g酵母浸膏、各0.5g?K₂HPO₄-KH₂PO₄，在37℃下培養24h后，菌落總數可達4.69×10⁸cfu/mL。萬紅兵等研究了在番茄汁基礎培養基中添加不同營養物質對保加利亞乳桿菌生長的影響，最后確定了增殖培養基的最佳配比：以番茄汁為基礎培養基，添加1.0%胰蛋白胨、0.5%酵母膏、0.3%碳酸鈣。專利CN200610012692.7公布了一種保加利亞乳桿菌復合增菌培養基，它是以菊芋汁為主要原料并添加其他成分。

發明內容

本發明解決的問題在于提供一種保加利亞乳桿菌增菌培養基及其制備方法，培養基廉價而且能使保加利亞乳桿菌大量生長，以實現高效濃縮型直投式發酵劑的工業化大規模生產。

本發明是通過以下技術方案來實現：

一種保加利亞乳桿菌增菌培養基，以質量份數計，包括以下組分：乳糖0.3～0.5份，酪蛋白水解物0.8～1份，K₂HPO₄0.5～0.8份，羥脯氨酸0.08～0.12份，谷氨酸0.04～0.05份，水100份，以及水體積0.3～0.4%的新生牛血清，pH值6.5～6.8。

具體的，保加利亞乳桿菌增菌培養基為：在每100ml的水中包括乳糖0.4g，新生牛血清0.4mL，酪蛋白水解物0.8g，質量濃度1%的羥脯氨酸溶液0.090mL，質量濃度1%的谷氨酸溶液0.050mL和K₂HPO₄0.59g，pH值6.5。

一種保加利亞乳桿菌增菌培養基的制備方法，包括以下步驟：

1）將羥脯氨酸和谷氨酸配制成質量濃度為1%的溶液，過濾除菌；

2）將新生牛血清過濾除菌；

3）將0.3～0.5份的乳糖、酪蛋白水解物0.8～1份、K₂HPO₄0.5～0.8份混合溶解于100份的水中，調pH至6.5～6.8，滅菌；加入經膜過濾的新生牛血清、質量濃度1%的羥脯氨酸溶液和質量濃度1%的谷氨酸溶液，其中新生牛血清為水的體積的0.3～0.4%，羥脯氨酸溶液為水的體積的0.08～0.12%，谷氨酸溶液為水的體積的0.04～0.05%；混勻后得到保加利亞乳桿菌增菌培養基。

所述步驟1）、2）的過濾除菌為用滅菌后的0.2微米的膜過濾除菌。

所述的膜是在121℃下滅菌20min。

所述的pH是用1moL/L?HCl溶液調節。

與現有技術相比，本發明具有以下有益的技術效果：

本發明提供的保加利亞乳桿菌增菌培養基，是一種廉價而且能使保加利亞乳桿菌大量生長的培養基，所涉及的培養基成分簡單而且便宜，都是比較常見的碳氮源，而且容易制取，因此是一種工業生產乳酸菌的好方法。

高效的濃縮型直投式發酵劑生產，首先必須獲得適合乳酸菌大量生長的增菌培養基。但保加利亞乳桿菌對營養的要求較為復雜，除基本的碳氮源外，一般還需要B族維生素、氨基酸類化合物以及其他生長因子。同時，實驗室使用的一般是MRS培養基，但其價格昂貴。