[發明專利]植物根部特異表達Bt-cry6A晶體蛋白在根結線蟲防治中的應用

有效

• 申請號: 201210470439.1
• 申請日: 2012-11-19
• 公開（公告）號: CN103045637A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 陳國華;梅眉;王殿東;田雪亮;茆振川;楊宇紅;謝丙炎
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蔬菜花卉研究所
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N1/21;A01H5/00;A01H4/00;C12R1/01
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 張濤

技術領域

本發明屬于植物病蟲防治技術領域，特別是涉及一種由根部特異啟動子DNA-βpromoter驅動的Bt-cry6A基因植物表達載體及其在根結線蟲防治和研究中的應用。

背景技術

根結線蟲是農業生產上危害最為嚴重的植物寄生線蟲之一，其適應性強、傳播途徑多樣、寄主范圍包括單子葉與雙子葉草本或木本植物等2000多種植物。近年來，隨著對線蟲侵染方式，植物自身抗病防御體系研究的不斷深入，以及分子生物學理論和生物工程技術的不斷發展，抗線蟲基因的分子遺傳操作技術已趨向成熟，為利用植物自身防御體系及線蟲自身生理生化特點，通過基因工程手段，建立一個具有高效、經濟、環保的線蟲綜合控防策略成為可能（Atkinson?HJ,Urwin?PE,McPherson?MJ.Engineering?plants?for?nematode?resistance.Annual?Review?of?Phytopathology，2003.41(1):615-639.；Williamson?VM,Hussey?RS.Nematode?pathogenesis?and?resistance?in?plants.Plant?Cell，1996，8：1735-1745；Williamson?VM.Plant?nematode?resistance?genes.Current?Opinion?in?Plant?Biology,1999,2:327-331；Williamson?VM,Gleason?CA.Plant-nematode?interactions.Current?Opinion?in?Plant?Biology，2003，6：327-333）。

在過去的植物基因工程研究中，人們常使用組成型啟動子表達外源基因，在這類啟動子的控制下，外源基因在轉基因植物所有的細胞以及整個發育階段都表達。然而外源基因在受體植物體內持續、高效地表達，可能會改變植物的某些性狀，從而對植物生長發育產生不利影響，嚴重地會導致植株死亡；另外，這種持續的組成型表達，從植物能量消耗角度來講也是一種浪費，還可能帶來食品安全性問題。嚴格地講，組織特異性的啟動子更適用于生產外源蛋白，因為這些蛋白可以集中表達在植物的某些部位從而更便于產物的加收。此外，根是植物生長發育的重要器官，也是根結線蟲侵染植物的主要途徑，研究根特異性啟動子對根結線蟲的防治具有重要意義。所以從植物生長發育和經濟有效的角度以及抗病性的研究方面考慮，根組織特異性啟動子也具有研究和應用價值。關翠平分離鑒定TYLCCNVY10分子上DNAβC1基因啟動子（GeneBank登錄號A3J19675)，組織化學檢測表明，該啟動子能夠驅動gus基因在轉基因植株的根部及韌皮部細胞特異性表達，是花椰菜花葉病毒(CMV)355啟動子活性的10~16%（Cuiping?Guan,Xueping?Zhou，Phloem?specific?promoter?from?a?satellite?associated?with?a?DNAvirus，Virus?Research?115(2006)150-157）。