[發明專利]一種發酵生產多肽類抗生素那西肽的方法

有效

• 申請號: 201210469137.2
• 申請日: 2012-11-20
• 公開（公告）號: CN102965420A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 韓風華;李國棟;鄒君彪;鄧健;黃苓
• 申請（專利權）人: 江西興鼎科技有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12R1/465
• 代理公司: 江西省專利事務所 36100
• 代理人: 楊志宇

1.發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：

技術方案如下：

（1）斜面培養；

（2）種子培養；

（3）發酵培養。

2.發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：

技術方案如下：

（1）斜面培養：將在北京北納創聯生物技術研究院購買的CPCC600041-活力鏈霉菌，菌株保藏編號為CPCC?600041，接種到營養培養基中，進行斜面培養，得到產孢子的斜面；

（2）種子培養：將斜面孢子接種到種子培養基中，進行種子培養，得到種子液，種子液的固形物含量占種子液總量的20-30%；

（3）發酵培養：將種子液按10%接種量接種到發酵培養基中，進行發酵培養；發酵得到褐色發酵液，進行預處理后，過濾后菌絲體用酒精和正丁醇萃取，得到那西肽純品。

3.如權利要求2所述的發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：斜面培養時，斜面營養培養基組成成分為g/L：葡萄糖30.0-40.0，蛋白胨5.0-10.0，(NH₄)₂SO_4?0.5-1.0，CaCO₃?3.0-5.0，瓊脂20.0-30.0；培養基pH7.1-7.3，培養溫度25-32℃，培養周期6-10天。

4.如權利要求2所述的發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：種子培養時，用0.9%的生理鹽水將斜面上培養的孢子制成孢子懸液，接種到50ml種子培養基中，種子培養基組成成分為g/L：玉米漿20.0-40.0，蛋白胨10.0-20.0，蔗糖5.0-10.0，(NH₄)₂SO_4??1.0-2.0，CaCO₃?3.0-5.0；培養基pH6.8-7.2，培養溫度25-32℃，轉速200-220rpm，振幅3-5cm，培養周期40-48h。

5.如權利要求2所述的發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：發酵培養基組成成分為g/L：葡萄糖30.0-40.0，黃豆粉20.0-30.0，淀粉30.0-40.0，菜籽油5.0-10.0，Na₂SO₄?0.5-1.0，(NH₄)₂SO₄?1.0-2.0，NaCl?1.0-2.0，MgSO₄?0.3-0.5，MnSO₄?0.03-0.05，CaCO₃?3.0-5.0；培養基pH6.8-7.2，培養溫度25-32℃，轉速200-250rpm，振幅3-5cm，培養周期9-10天。

6.如權利要求3所述的發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：斜面培養時，斜面營養培養基組成成分為g/L：葡萄糖35.0，蛋白胨7.0，(NH₄)₂SO_4?0.7，CaCO₃?4.0，瓊脂25.0；培養基pH7.2，培養溫度28℃，培養周期8天。

7.如權利要求4所述的發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：種子培養時，用0.9%的生理鹽水將斜面上培養的孢子制成孢子懸液，接種到50ml種子培養基中，種子培養基組成成分為g/L：玉米漿30.0，蛋白胨15.0，蔗糖7.0，(NH₄)₂SO_4??1.5，CaCO₃?4.0；培養基pH7.0，培養溫度28℃，轉速210rpm，振幅4cm，培養周期44h。

8.如權利要求5所述的發酵法生產多肽類抗生素那西肽的方法，其特征為：發酵培養基組成成分為g/L：葡萄糖35.0，黃豆粉25.0，淀粉35.0，菜籽油7.0，Na₂SO₄?0.7，(NH₄)₂SO₄?1.5，NaCl?1.5，MgSO₄?0.4，MnSO₄?0.04，CaCO₃?4.0；培養基pH7.0，培養溫度28℃，轉速225rpm，振幅4cm，培養周期9.5天。