[發明專利]一種發酵生產恩拉霉素的方法

有效

• 申請號: 201210466719.5
• 申請日: 2012-11-19
• 公開（公告）號: CN102943101A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發明（設計）人: 張雪鋒;潘聲龍;鄭輝
• 申請（專利權）人: 安徽豐原發酵技術工程研究有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12R1/465
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

技術領域

本發明涉及發酵技術領域，具體為一種發酵生產恩拉霉素的方法。

背景技術

恩拉霉素(Enramycin)，又名恩來霉素、恩素、安來霉素、持久霉素，它屬于一種多肽類抗生素，分子呈環狀結構，是不飽和脂肪酸與十幾種氨基酸結合的多肽類抗生素，氨基酸分子組成環狀多肽，在末端的天冬氨酸上連接脂肪酸分子，根據分子末端的脂肪酸分子不同可分為恩拉霉素A和恩拉霉素B，一般所說恩拉霉素是該兩種組分的混合物，恩拉霉素是由從土壤中分離得到的放線菌(Streptomyces?fungiedious)發酵生產的一種多肽類抗生素。他對革蘭氏陽性菌有較強的抑制作用，作用機理是阻礙革蘭氏陽性菌細胞壁的合成。其敏感細菌主要有金黃色葡萄球菌等各種革蘭氏陽性球菌、枯草桿菌、炭蛆桿菌破傷風梭菌、肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌等。長期大量使用恩來霉素不易產生抗藥性，并且它能改善動物腸道內細菌的菌落分布，有利于動物對飼料的消化吸收，能夠促進動物體重的增加和飼料的利用率，因此許多國家推薦此藥物為畜禽的抗生素和促生長劑。恩拉霉素的另一個特點是不易被動物吸收，畜禽體內殘留很少。恩拉霉素于1966年由武田藥品工業株氏會社研發，并在1974年在日本正式注冊，其后許多被國家注冊和廣泛使用。我國農業部在1993年批準該藥在我國注冊。2005年，國內生產企業與美國先靈葆雅動物保健品有限公司(Schering?Plough?Animal?Health?Corp.)開始合作生產恩拉霉素預混劑。

產恩拉霉素菌株對氧的需求量很高，當菌體濃度過高會造成發酵過程溶氧供應不足，影響發酵生產強度。如果菌濃度過低，恩拉霉素產出較慢，發酵周期過長，菌體老化，達不到較好效果。所以生產中需要通過改變流加糖的濃度改善發酵液的溶氧量，提高發酵水平。

發明內容

本發明的目的在于提供一種發酵生產恩拉霉素的方法，以克服上述現有技術中存在的缺陷。

本發明涉及的用于發酵生產恩拉霉素的菌株為殺真菌素鏈霉菌(Streptomyces?fungicidious)FYFJ03，保藏號為CGMCC?No.4113，已在中國專利CN101974469A中公開。

本發明提供的發酵生產恩拉霉素的方法是通過使發酵菌株FYFJ03在發酵培養基中恒溫培養的發酵過程中，在不同階段分別流加不同的糖濃度，從而能夠改善發酵液中的溶解氧，實現提高恩拉霉素的發酵水平的技術效果。

本發明的發酵生產恩拉霉素的方法中，發酵過程為：將發酵用菌株接種于固體斜面培養基上，25-30℃恒溫培養。

其中，流加的糖為淀粉水解糖。

優選地，流加的糖為葡萄糖、麥芽糖、糊精。

其中于發酵過程中，在發酵36～60小時后，流加濃度為200～300g/L的糖；在發酵60～90小時后，流加濃度為350～450g/L的糖；在發酵90小時以后，流加濃度為500～600g/L的糖，從而可以較好地控制發酵液中溶氧，提高發酵生產強度，提高和加快恩拉霉素的生產，降低發酵周期，實現較好的技術效果。

優選地，發酵過程中，在發酵36-60小時后，流加濃度為225-275g/L的糖；在發酵60-90小時后，流加濃度為375-425g/L的糖；在發酵90小時以后，流加濃度為525-575g/L的糖。

更優選地，發酵過程中，在發酵36-60小時后，流加濃度為250g/L的糖；在發酵60-90小時后，流加濃度為400g/L的糖；在發酵90小時以后，流加濃度為550g/L的糖。

本發明的發酵培養過程中，所述發酵生產恩拉霉素的發酵培養基包括下述組分：玉米粉80-120g/L，玉米漿8-12g/L，硫酸銨2.5-3.5g/L，硫酸鋅0.05-0.15g/L，碳酸鈣18-22g/L。

本發明用來發酵生產恩拉霉素的發酵培養基包括下述組分：玉米粉100g/L，玉米漿10g/L，硫酸銨3g/L，硫酸鋅0.1g/L，碳酸鈣20g/L。

本發明提供的發酵生產恩拉霉素的方法解決了菌株發酵過程中溶氧量不足的問題，操作簡單易行，在發酵培養過程中通過該工藝發酵后，較普通方法(維持流加糖的濃度不變直到發酵)恩拉霉素發酵水平的可提高約20％，有效提高了發酵水平。

具體實施方式

以下實施例進一步說明本發明的內容，但不應理解為對本發明的限制。在不背離本發明精神和實質的情況下，對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發明的范圍。