[發(fā)明專利]制備抗體F(ab’)2片段的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210464842.3 | 申請日： | 2012-11-16 |
| 公開（公告）號： | CN103820515B | 公開（公告）日： | 2017-07-04 |
| 發(fā)明（設計）人： | 顏重河;蘇暉鈞 | 申請（專利權）人： | 財團法人農業(yè)科技研究院 |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06;C07K1/18;A61K39/395 |
| 代理公司： | 北京連和連知識產(chǎn)權代理有限公司11278 | 代理人： | 王淑麗 |
| 地址： | 中國臺灣新竹*** | 國省代碼： | 臺灣;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 制備 抗體 ab sub 片段 方法 | ||
1.一種由血清或血漿制備抗體F(ab’)2片段的方法，其特征在于，包含下列步驟：
將血清或血漿中的抗體以胃蛋白酶(Pepsin)水解以獲得抗體F(ab’)2片段；
將所述抗體F(ab’)2片段以切向流過濾系統(tǒng)(Tangential Flow Filtration System)進行濃縮并置換緩沖液，其中所述緩沖液的置換使所述抗體F(ab’)2片段帶有正電荷；以及
將所述抗體F(ab’)2片段以陽離子交換管柱進行純化，并以鹽類水溶液置換經(jīng)純化的抗體F(ab’)2片段，
其中所述經(jīng)純化的抗體F(ab’)2片段不含有血清白蛋白、完整抗體分子及抗體Fc片段。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，進一步包含將所述經(jīng)純化的抗體F(ab’)2片段以第二過濾系統(tǒng)進行濃縮并置換第二緩沖液的步驟。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述緩沖液的pH值小于所述抗體F(ab’)2片段的等電點(pI)值。
4.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于，所述緩沖液為pH 4.3的醋酸鈉溶液。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述鹽類水溶液為濃度0.1M至2M的氯化鈉(NaCl)水溶液。
6.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述第二過濾系統(tǒng)為切向流過濾系統(tǒng)(Tangential Flow Filtration System)。
7.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述第二緩沖液為生理食鹽水。
8.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗體為免疫球蛋白(immunoglobulin)。
9.根據(jù)權利要求8所述的方法，其特征在于，所述免疫球蛋白為IgG、IgA或IgM。
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