[發(fā)明專利]一種金耳發(fā)酵美白液的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210464470.4
• 申請日: 2012-11-19
• 公開（公告）號: CN102908303A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧超;王敏;陳敬華;滕麗萍
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;C12N1/14;A61Q19/02;A61K8/67;A61K8/73
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1.一種金耳發(fā)酵美白液的制備方法，其特征在于：外觀為淡黃色液體，是金耳通過深層發(fā)酵獲得的發(fā)酵液經(jīng)過濃縮，脫蛋白，透析后再加入VC磷酸酯，透明質(zhì)酸和蒸餾水，濾過除菌后制得；其中發(fā)酵液所含氨基酸中甘氨酸占38％以上，纈氨酸占9％以上，苯丙氨酸占7％以上，酪氨酸占7％以上，亮氨酸占6％以上；

所述的美白液的制備方法，步驟如下：

(1)菌種培養(yǎng)

出發(fā)菌種為實(shí)驗(yàn)室斜面保藏菌種；

①搖瓶種子培養(yǎng)

(1)搖瓶種子培養(yǎng)

搖瓶種子培養(yǎng)基：PDA1L加磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g，牛肉膏2g，蛋白胨1g，pH6.0；

培養(yǎng)方法：從活化的斜面菌種中取3～4塊黃豆大小相同的菌塊，接種于搖瓶種子培養(yǎng)基中，250mL三角瓶裝培養(yǎng)基100mL于25℃，120r/min，振蕩培養(yǎng)7d；

(2)搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)

發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖4g/100mL、酵母粉1g/100mL、磷酸二氫鉀0.2g/100mL、硫酸鎂0.05g/100mL；

培養(yǎng)方法：將培養(yǎng)好的種子以15％的接種量接入搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基中25℃，120r/min，振蕩培養(yǎng)7d；

(3)發(fā)酵液濃縮，脫蛋白，透析

培養(yǎng)后離心，取上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后用Sevage法去除游離蛋白，即按發(fā)酵液1/5的體積加入氯仿，然后加入氯仿體積1/5的正丁醇，混合后振蕩過夜后4000rpm離心20min，收集上清液，反復(fù)操作5次至氯仿-正丁醇層不渾濁為止。然后取上清液中裝入透析袋中，扎緊袋口，懸浮于蒸餾水中，透析72h，中間每隔12小時換水一次，得發(fā)酵液；

(2)發(fā)酵液濃縮，脫蛋白，透析

培養(yǎng)后離心，取上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后用Sevage法去除游離蛋白，然后取上清液透析；

(3)其他組分的添加及濾過除菌

①其他組分的添加

發(fā)酵液濃縮后加入VC磷酸酯、透明質(zhì)酸和蒸餾水；

取濃縮后的發(fā)酵液60g-80g，加入VC磷酸酯5g-8g；透明質(zhì)酸0.1g-0.5g；蒸餾水補(bǔ)足100mL；

②濾過除菌

上述液體通過0.22μm的濾膜除菌。

2.如權(quán)利要求1所述的一種金耳發(fā)酵美白液的制備方法，其特征在于：所述用Sevage法去除游離蛋白，是按發(fā)酵液1/5的體積加入氯仿，然后加入氯仿體積1/5的正丁醇，混合后振蕩過夜后4000rpm離心20min，收集上清液，反復(fù)操作5次至氯仿-正丁醇層不渾濁為止。

3.如權(quán)利要求1所述的一種金耳發(fā)酵美白液的制備方法，其特征在于所述的透析是指將去除游離蛋白質(zhì)的發(fā)酵液裝入透析袋中，扎緊袋口，懸浮于蒸餾水中，透析72h，中間每隔12小時換水一次。