[發(fā)明專利]采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性與定量檢測的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210461525.6
• 申請日: 2012-11-16
• 公開（公告）號: CN102944672A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李方和;李時君
• 申請（專利權(quán)）人: 李方和
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N21/76
• 代理公司: 武漢開元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104
• 代理人: 黃行軍;徐紹新

1.一種采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性或定量檢測的方法，包括如下步驟：向血清中依次加入包被靶物質(zhì)抗體的發(fā)光微球、生物素標(biāo)記的靶物質(zhì)抗體、鏈親和素包被的感光微球，混勻后溫育以發(fā)生免疫反應(yīng)；然后用激發(fā)光激發(fā)上述免疫反應(yīng)后的反應(yīng)體系，并第一次檢測反應(yīng)體系所發(fā)出的發(fā)射光的光子信號強(qiáng)度，檢測出的光子信號強(qiáng)度依據(jù)靶物質(zhì)濃度與發(fā)光信號強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)曲線關(guān)系，第一次確定靶物質(zhì)含量；其特征在于：在第一次檢測反應(yīng)體系所發(fā)出的發(fā)射光的光子信號強(qiáng)度后，向免疫反應(yīng)后的反應(yīng)體系中加入抗He試劑，混勻后溫育發(fā)生免疫疊加反應(yīng)；然后用激發(fā)光激發(fā)上述免疫疊加反應(yīng)后的反應(yīng)體系，并第二次檢測反應(yīng)體系所發(fā)出的發(fā)射光的光子信號強(qiáng)度；

根據(jù)第一次和第二次的光子信號強(qiáng)度推導(dǎo)新的靶物質(zhì)含量與信號強(qiáng)度的關(guān)系，并據(jù)此計算待測標(biāo)本中的靶物質(zhì)濃度：

所述的反應(yīng)體系與抗He試劑的體積比為5-50:1；

所述待測靶物質(zhì)為抗原時，所述的抗He試劑中靶物質(zhì)的濃度為10-200000ng/ml；

所述待測靶物質(zhì)為抗體時，所述的抗He試劑中靶物質(zhì)的濃度為1-20000IU/ml。??

2.如權(quán)利要求1所述的采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性與定量檢測的方法，其特征在于：所述待測靶物質(zhì)為抗原，所述的抗He試劑中靶物質(zhì)的濃度為2000ng/ml。

3.如權(quán)利要求1所述的采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性與定量檢測的方法，其特征在于：所述待測靶物質(zhì)為抗體，所述的抗He試劑中靶物質(zhì)的濃度為1000IU/ml。

4.如權(quán)利要求1所述的采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性與定量檢測的方法，其特征在于：所述的反應(yīng)體系與抗He試劑的體積比為10:1。

5.如權(quán)利要求1所述的采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性與定量檢測的方法，其特征在于：所述激發(fā)光波長為680nm，發(fā)射光波長為610-615nm。

6.如權(quán)利要求1所述的采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性與定量檢測的方法，其特征在于：所述包被靶物質(zhì)抗體的發(fā)光微球的濃度為10-100μg/ml，所述生物素標(biāo)記的靶物質(zhì)抗體濃度為1.0-10μg/ml，所述鏈親和素包被的感光微球濃度為10-100μg/ml，所述血清與包被靶物質(zhì)抗體的發(fā)光微球、生物素標(biāo)記的靶物質(zhì)抗體、鏈親和素包被的感光微球的體積比依次為1:1:1:7。

7.如權(quán)利要求1所述的采用光激發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫分析對血清中的待測靶物質(zhì)進(jìn)行定性與定量檢測的方法，其特征在于：所述溫育的時間為5～60分鐘。

8.權(quán)利要求?1所述的方法在血清HBsAg定性和定量檢測中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求?1所述的方法在血清抗HBc定性和定量檢測中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求?1所述的方法在血清AFP定性和定量檢測中的應(yīng)用。