[發明專利]一種紅豆杉中7-木糖-10-去乙?；仙即嫉谋由V檢測方法

無效

• 申請號: 201210460881.6
• 申請日: 2012-11-15
• 公開（公告）號: CN103808853A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 劉勝遠
• 申請（專利權）人: 劉勝遠
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種檢測方法，具體涉及一種紅豆杉中7-木糖-10-去乙?；仙即嫉谋由V檢測方法。

背景技術

紫杉醇是紅豆杉屬植物中的一種復雜的次生代謝產物,也是目前所了解的惟一一種可以促進微管聚合和穩定已聚合微管的藥物。同位素示蹤表明，紫杉醇只結合到聚合的微管上，不與未聚合的微管蛋白二聚體反應。細胞接觸紫杉醇后會在細胞內積累大量的微管，這些微管的積累干擾了細胞的各種功能，特別是使細胞分裂停止于有絲分裂期，阻斷了細胞的正常分裂。通過Ⅱ-Ⅲ臨床研究，紫杉醇主要適用于卵巢癌和乳腺癌，對肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效。

7-木糖-10-去乙?；仙即伎梢酝ㄟ^生物轉化和化學合成為紫杉醇，所以檢測7-木糖-10-去乙?；仙即际侵匾?。

常規的7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇檢測方法為HPLC檢測，填料為反相填料。流動相為乙腈-水，檢測器是紫外檢測器。

發明內容

常規的HPLC檢測7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇方法要求高：

⑴需要一臺HPLC，一臺HPLC價格通常10萬以上，HPLC價格高，普及率低；

⑵HPLC需要有專業的人員操作、維護和維修；

⑶HPLC檢測需要大量溶劑，大量溶劑的使用對環境也造成了極大的污染；

⑷HPLC檢測每次只能檢測一個樣品，檢測時間也長。

本發明提供了一種易于操作、能定性半定量和經濟的薄層色譜檢測方法，該方法解決HPLC檢測的部分弊端。

一種紅豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟：

⑴稱取7-木糖-10-去乙?；仙即?.1～1mg，用1ml有機溶劑溶解，得到7-木糖-10-去乙?；仙即紝φ掌啡芤?；

⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3～1/2，用等體積有機溶劑Ⅰ萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，稱取蒸干粉末0.1～1mg，用1ml有機溶劑Ⅱ溶解，得到樣品溶液；

⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5～10μl，點在同一硅膠G薄層板上，展開劑是鹵代烴和醇，鹵代烴和醇的體積比是100：10～1，展開，取出，晾干，用5～10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105℃烘干薄層板至斑點顯色。

所述方法步驟⑴中的有機溶劑優選為甲醇、無水乙醇或N，N-甲基甲酰胺，N，N-甲基甲酰胺溶解7-木糖-10-去乙?；仙即既芙舛雀?，甲醇和無水乙醇沸點低。

所述方法步驟⑴紅豆杉原料優選為樹皮、枝葉和樹根。

所述方法步驟⑵醇溶液優選為甲醇、無水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。

所述方法步驟⑵有機溶劑Ⅰ優選為二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。

所述方法步驟⑵有機溶劑Ⅱ優選為甲醇、無水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺，N，N-二甲基甲酰胺溶解7-木糖-10-去乙?；仙即既芙舛雀撸状己蜔o水乙醇沸點低。

所述方法步驟⑶鹵代烴優選為二氯甲烷或三氯甲烷。

所述方法步驟⑶醇優選為甲醇或無水乙醇。

本發明有益效果是：

⑴7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇檢測方法簡單、實用和經濟。

⑵一次檢測可以同時檢測多個樣品。

⑶檢測結果可以定性和半定量。

具體實施方式

下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。

實施例1

一種紅豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟：

⑴稱取7-木糖-10-去乙?；仙即紭藴势?.5mg，用1ml甲醇超聲溶解，得到7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇對照品溶液，濃度0.5mg/ml，作為定性和半定量的標準；

⑵將紅豆杉樹皮、枝葉和樹根粉碎，粉碎后用無水乙醇浸提三次，合并三次浸提溶液，減壓蒸餾法濃縮浸提溶液，真空度0.8MPa，水浴溫度55℃，濃縮至原體積的1/3，用等體積二氯甲烷萃取濃縮液三次，合并三次萃取相，減壓蒸餾法蒸干萃取相，真空度0.4MPa，水浴溫度35℃，稱取蒸干粉末0.5mg，用1ml甲醇超聲溶解，得到樣品溶液；

⑶用玻璃點樣毛細管吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各10μl，點在同一硅膠G薄層板、距板底1cm處同一水平線上，展開劑是三氯甲烷和無水乙醇，三氯甲烷和無水乙醇的體積比是100：5，平衡5～10min，展開，展開至距板頂1cm處取出，取出，用熱風吹干，用10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105℃烘干薄層板至斑點顯色。