[發明專利]枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白CotZ作為分子載體在芽孢表面展示外源蛋白的應用

無效

• 申請號: 201210460863.8
• 申請日: 2012-11-16
• 公開（公告）號: CN103014054A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 楊瑞金;王賀;華霄
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/75
• 分類號: C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.利用枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白CotZ作為分子載體在芽孢表面展示外源蛋白的應用。

2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，利用枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白CotZ作為分子載體，與外源目的蛋白基因融合，構建整合型重組質粒，并轉化枯草芽孢桿菌得到枯草芽孢桿菌重組菌，經誘導后重組菌株產生表面展示外源目的蛋白的重組芽孢。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，外源目的蛋白基因為編碼具有生物活性的蛋白或酶。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，外源目的蛋白基因為編碼具有保護性抗原蛋白或具有催化活性的酶蛋白基因的編碼序列。

5.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述的整合型重組質粒是將枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白基因cotZ與外源目的蛋白基因融合得到的質粒，重組質粒中含有整合基因amyE片段、適用于大腸桿菌或枯草芽孢桿菌的抗性選擇標記基因、芽孢衣殼蛋白CotZ的啟動子和不含終止密碼子的編碼序列與目的蛋白編碼序列融合后的基因。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的枯草芽孢桿菌重組菌株是整合型重組質粒轉化枯草芽孢桿菌的所得菌株，該菌株染色體上含有適用于枯草芽孢桿菌的抗性選擇標記基因、芽孢衣殼蛋白CotZ基因的啟動子和不含終止密碼子的編碼序列與目的蛋白基因的編碼序列的融合基因，這些基因通過同源雙交換被整合到染色體上的淀粉酶基因中并致使重組菌株的淀粉酶失活。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于，所述的重組芽孢是重組枯草芽孢桿菌經誘導后形成的，重組芽孢表面展示有目的蛋白。