[發(fā)明專利]一種制備脂肪酶抑制劑奧利司他的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210460628.0
• 申請日: 2012-11-15
• 公開（公告）號(hào): CN102936234A
• 公開（公告）日: 2013-02-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 石利平;李玲;尹曉龍;吉民;徐春濤;萬新強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇阿爾法藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C07D305/12
• 分類號(hào): C07D305/12
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;呂鵬濤

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分離工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種制備奧利司他的方法，具體涉及一種利用混合溶劑超聲波法初提鏈霉菌菌絲體中的利普司他汀，將利普司他汀粗提物氫化后，利用大孔樹脂提取得到奧利司他純品的方法。

背景技術(shù)

伴隨著科技的飛速發(fā)展、物質(zhì)生活條件的改善和豐富膳食的獲得，肥胖癥已逐漸成為當(dāng)今世界一大多發(fā)性疾病。當(dāng)人體進(jìn)食熱量多于消耗熱量時(shí)，多余熱量以脂肪的形式儲(chǔ)存于體內(nèi)，久而久之造成肥胖。無明顯病因可尋者成為單純性肥胖，具有明確病因者稱之為繼發(fā)性肥胖。隨著人們物質(zhì)生活水平的不斷提高，單純性肥胖正逐漸成為一種較為常見的病癥。不僅影響美觀而且可能誘發(fā)多種疾病如非胰島素依賴型糖尿病、心臟病、腦血管疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、某些癌癥。因此對它的防治有著十分重要的臨床意義。科學(xué)家們從未停止過對新的安全性較高的治療肥胖藥物的研究和開發(fā)。目前，應(yīng)用的減肥藥主要分為食欲抑制劑、產(chǎn)熱劑、消化吸收阻滯劑、激素調(diào)控劑四大類。

利普司他汀是Stretomyces?toxytricini(毒三素鏈霉菌)的代謝產(chǎn)物，能選擇性抑制腸道中的胰脂肪酶的活性，減少脂肪的水解和吸收；其四羥基衍生物奧利司他已被Roche公司開發(fā)為減肥藥物，于1997年得到美國FDA認(rèn)證。目前已在全球100多個(gè)國家上市，擁有900多萬的使用者，占全球2/3的減肥藥市場份額。是目前上市的減肥藥物中，唯一一個(gè)作為非中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用上市的治療肥胖癥的藥物。奧利司他是一種安全的肥胖治療藥物，不僅可以減輕患者體重，而且可以改善血脂濃度、降低血壓、改善血糖控制、降低患心血管等疾病的危險(xiǎn)；該藥物可降低吸收大約30%的脂肪，確保患者能減輕體重。人體對奧利司他的吸收率低于1%，因此不會(huì)引起全身性副作用；奧利司他抑制食物中脂肪的吸收，會(huì)導(dǎo)致油樣便，服用者的輕重程度隨飲食中脂肪含量的不同而不同，患者可通過調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)，減少脂肪的攝入量。

正是由于奧利司他具有高效、安全、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)，在中國上市的短時(shí)間內(nèi)，市場份額迅速上升，已成為減肥藥品市場的一線產(chǎn)品，課題組通過大量的實(shí)驗(yàn)研究，確定了應(yīng)用大孔樹脂提取利普司他汀及制備奧利司他的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種利用超聲波法初提鏈霉菌菌絲體中的利普司他汀，將利普司他汀粗提物氫化后，利用大孔樹脂及混合洗脫溶劑提取得到奧利司他純品的方法。

為達(dá)到上述目的，可通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種制備奧利司他的方法，包括以下幾個(gè)步驟：

A、將鏈霉菌發(fā)酵后得到的利普司他汀產(chǎn)生菌菌絲體，清洗后懸浮在萃取劑中，控制pH值在4.0~9.0之間進(jìn)行微生物細(xì)胞破碎，得到含有利普司他汀的混合物；

B、將含有利普司他汀的混合物振蕩提取，得到含有利普司他汀的提取液；

C、將含有利普司他汀的提取液離心，收集上清液，將上清液減壓濃縮至無液體，得到利普司他汀粗提品；

D、將利普司他汀粗提品溶于溶劑中，在鈀催化劑作用下進(jìn)行催化加氫得到奧利司他，重結(jié)晶得到奧利司他粗品；

E、用溶劑溶解奧利司他粗品，采用大孔樹脂靜止吸附2~5h，再用兩種洗脫劑共同進(jìn)行梯度洗脫，最后濃縮干燥后得到奧利司他純品。

本發(fā)明中的原料利普司他汀產(chǎn)生菌菌絲體，是利用鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)利普司他汀發(fā)酵液中的菌絲體，本發(fā)明對鏈霉菌的種類并無具體要求，只要是能夠發(fā)酵生產(chǎn)利普司他汀的鏈霉菌都可以應(yīng)用。作為舉例，本發(fā)明的實(shí)施例中采用購自美國農(nóng)業(yè)研究菌種保藏中心的鏈霉菌Stretomyces?toxytricini?NRRL?15443的發(fā)酵液。

步驟A中，采用超聲儀進(jìn)行微生物細(xì)胞破碎。

其中的萃取劑為甲醇、乙醇、甲醇水溶液、乙醇水溶液、氯化鈉與甲醇、氯化鈉與乙醇或其水溶液，其中甲醇或乙醇體積濃度為10%~100%（100%即純?nèi)軇然c的濃度為0.01~0.1mol/L，優(yōu)選0.03~0.09mol/L。

其中利普司他汀產(chǎn)生菌菌絲體與萃取劑的質(zhì)量體積比為1：10~200g/mL，優(yōu)選1：10~100g/mL，進(jìn)一步優(yōu)選1：10~50g/mL。

步驟A中菌絲體的清洗可直接采用去離子水。

步驟B中，優(yōu)選采用搖瓶柜進(jìn)行振蕩提取，調(diào)節(jié)搖瓶柜的溫度10~20℃（優(yōu)選15℃），轉(zhuǎn)速100~300rpm（優(yōu)選180rpm），提取時(shí)間為1.0~4.0h。