[發明專利]來自冷凍的臍帶組織的活細胞

在審

• 申請號: 201210460386.5
• 申請日: 2006-12-21
• 公開（公告）號: CN103173401A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 簡·恩尼斯;拉胡爾·薩魯加瑟;約翰·E·戴維斯
• 申請（專利權）人: 簡·恩尼斯;拉胡爾·薩魯加瑟;約翰·E·戴維斯
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;A01N1/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 杜艷玲;孟慧嵐

1.用于從低溫冷凍的臍帶組織回收活細胞的方法，包括步驟：

1)獲得低溫保存的臍帶組織，其中臍帶組織是(1)具有包含祖細胞的血管周圍臍帶膠質的臍帶血管，(2)所述血管的片段，或(3)獲自所述血管的臍帶膠質組織，并且已通過包括下述步驟的方法得以制備：

a)獲得包含活細胞的臍帶組織，

b)通過浸沒于含有含血清細胞培養基和低溫防護劑的低溫防護溶液將所述臍帶組織組合，和

c)對組合物進行冷卻處理，其中組合物在容許低溫防護劑滲入組織的時間和溫度下作為液體被冷卻，

d)冷凍所冷卻的組合物以提供冷凍的組織，并任選地接著

e)在低溫條件下保存所冷凍的組織；

2)使冷凍的臍帶組織解凍；

3)處理解凍的臍帶組織以用水置換低溫防護劑；以及

4)從這樣處理的臍帶組織中回收活細胞。

2.用于保留存在于臍帶組織中的祖細胞的存活力的方法，包括步驟：

a)獲得包含活祖細胞的臍帶組織，其中臍帶組織是(1)具有包含所述祖細胞的血管周圍臍帶膠質的臍帶血管，(2)所述血管的片段，或(3)獲自所述血管的臍帶膠質組織，

b)通過用含有含血清細胞培養基和低溫防護劑的低溫防護溶液浸沒將所述臍帶組織組合；

c)對組合物進行冷卻處理，其中組合物在容許低溫防護劑滲入組織的時間和溫度下作為液體被冷卻，

d)冷凍所冷卻的組合物，并任選地，接著

e)在低溫條件下保存所冷凍的組合物。

3.根據權利要求1或2的方法，其中低溫防護劑為DMSO。

4.根據權利要求1或2的方法，其中細胞培養基包含胎牛血清。

5.根據權利要求4的方法，其中通過從臍帶膠質提取來回收活細胞。

6.處于低溫保存狀態并包含能以存活狀態回收的祖細胞的臍帶組織，只要通過根據權利要求2-5任一項的方法所制備。

7.根據權利要求6的臍帶組織，以包含多個容器和注明每個容器內含物的目錄的組織庫形式存在，其中每個容器包含所述臍帶組織的樣品。

8.從冷凍的臍帶組織回收活HUCPVCs的方法，包括步驟：

1)獲得低溫保存的臍帶組織，其中臍帶組織為(1)具有包含所述HUCPVC祖細胞的血管周圍臍帶膠質的新鮮的、分離的臍帶血管，(2)所述血管的片段，或(3)獲自所述血管的臍帶膠質組織，并已通過包括下述步驟的方法得以制備：

a)獲得所述臍帶組織，

b)通過用含有含血清細胞培養基和DMSO的低溫防護溶液浸沒將所述臍帶組織組合，

c)對組合物進行冷卻處理，其中組合物在容許DMSO滲入組織的時間和溫度下作為液體被冷卻，

d)冷凍所冷卻的組合物，和

e)在低溫條件下保存所冷凍的組合物一段時間；并接著

2)使保存的臍帶組織解凍；

3)處理解凍的臍帶組織以用水置換DMSO；以及

4)消化與保存的血管締合的臍帶膠質以釋放活HUCPVCs。

9.根據任一前述權利要求的方法，其中所述臍帶組織是具有包含所述HUCPVC祖細胞的血管周圍臍帶膠質的臍帶血管的片段。

10.根據權利要求1-9任一項的方法，其中所述臍帶組織是包含HUCPVC祖細胞的臍帶膠質，其中所述臍帶膠質獲自臍帶血管的血管周圍區。