[發(fā)明專利]微生物菌群結(jié)構(gòu)的快速定性與定量方法及其在中國白酒生產(chǎn)中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210455542.9
• 申請日: 2012-11-14
• 公開（公告）號: CN102911998A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐巖;吳群
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12Q1/68
• 代理公司: 無錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所 32104
• 代理人: 時(shí)旭丹;劉品超

1.一種分析微生物菌群結(jié)構(gòu)的方法，其特征在于，所述分析的微生物菌群結(jié)構(gòu)為多微生物發(fā)酵系統(tǒng)的菌落結(jié)構(gòu)，將樣品與無菌水混合后，稀釋涂布鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)：

（a）酵母鑒別培養(yǎng)基中含以g/L計(jì)：葡萄糖：20～80；酵母膏：5～10；蛋白胨：5～10；氯化鉀：0.1～0.5；氯化錳：0.001～0.01；氯化鈣：0.1～0.5；硫酸鎂：0.1～0.5；硫酸鐵：0.001～0.01；硫酸銅：0.02～0.05；百里酚藍(lán)：0.01～1；溴甲酚綠：0.01～1；瓊脂：15～20；4～30℃培養(yǎng)2～6天；

（b）細(xì)菌鑒別培養(yǎng)基中含以g/L計(jì)：牛肉膏：5～10；酵母膏：10～20；蛋白胨：10～30；氯化鈉：5～10；硫酸鐵：0.001～0.01；氯化錳：0.001～0.01；瓊脂：15～20；溴甲酚紫：0.01～0.5；25～37℃培養(yǎng)1～3天；

（c）霉菌鑒別培養(yǎng)基中含以g/L計(jì)：牛肉膏：5～10；蛋白胨：5～10；葡萄糖10～50；硫酸鎂：0.5～1.0；硫酸錳：0.001～0.01；孟加拉紅：0.01～0.5；溴酚紅：0.01～0.5；氯霉素：0.01～0.5；瓊脂：15～20；25～35℃培養(yǎng)2～5天；

包括如下鑒別步驟：

（1）采用分子方法對酵母、細(xì)菌、霉菌三類微生物進(jìn)行種屬鑒定，其中，對酵母26srDNA序列，細(xì)菌16srDNA序列，霉菌18srDNA序列進(jìn)行測序并與數(shù)據(jù)庫比對，建立鑒定微生物的種屬的對應(yīng)關(guān)系；

（2）通過微生物在鑒別培養(yǎng)基上的形態(tài)來鑒別微生物的種屬；

細(xì)菌類：Bacillus?licheniformis如圖1中B1形態(tài)，

Bacillus?amyloliquefaciens如圖1中B2形態(tài)，

Bacillus?subtilis如圖1中B3形態(tài)，

Staphylococcus?saprophyticus如圖1中B4形態(tài)，

Bacillus?cereus如圖1中B5形態(tài)，

Paenibacillus?lactis如圖1中B6形態(tài)，

Paenibacillus?cineris如圖1中B7形態(tài)，

Brevibacillus?borstelensis如圖1中B8形態(tài)；

Bacillus?tequilensis如圖1中B9形態(tài)，

Staphylococcus?lentus如圖1中B10形態(tài)，

Bacillus?marisflavi如圖1中B11形態(tài)，

Bacillus?oleronius如圖1中B12形態(tài)；

酵母類：Saccharomyces?cerevisiae如圖2中Y1形態(tài)，

Pichia?membranifaciens如圖2中Y2形態(tài)，

Zygosaccharomyces?bailii如圖2中Y3形態(tài)，

Rhodotorula?mucilaginosa如圖2中Y4形態(tài)，

Schizosaccharomyces?pombe如圖2中Y5形態(tài)，

Issatchenkia?orientalis如圖2中Y6形態(tài)；

Geotrichum?candidum如圖2中Y7形態(tài)，

Pichia?anomala如圖2中Y8形態(tài)，

Pichia?manshurica如圖2中Y9形態(tài)；

霉菌類：Rhizopus?microsporus如圖3中F1形態(tài)，

Aspergillus?fumigatus如圖3中F2形態(tài)，

paecilomyces?varioti如圖3中F3形態(tài)，

Aspergillus?flavus如圖3中F4形態(tài)；

Aspergillus?oryzae如圖3中F5形態(tài)，

Aspergillus?niger如圖3中F6形態(tài)；

（3）并通過對特定菌落形態(tài)微生物的計(jì)數(shù)來對不同類微生物進(jìn)行定量分析。