[發(fā)明專利]一種包含分子標(biāo)志物的食用油及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210454659.5
• 申請日: 2012-11-13
• 公開（公告）號: CN103798414A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊曉林;孫旭東;李東亮
• 申請（專利權(quán)）人: 楊曉林;孫旭東;李東亮
• 主分類號: A23D7/04
• 分類號: A23D7/04;A23D9/04;G01N30/02
• 代理公司: 北京瑞恒信達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11382
• 代理人: 李渤;張偉

1.一種食用油，該食用油包含濃度為1~80μg/ml的原花青素。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食用油，其特征在于，所述食用油包含濃度為2~20μg/ml的原花青素。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的食用油的制備方法，該制備方法包括以下步驟：向食用油中添加原花青素和/或包含原花青素的原料，使得食用油包含濃度為1~80μg/ml的原花青素。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：向食用油中添加原花青素和/或包含原花青素的原料，使得食用油包含濃度為2~20μg/ml的原花青素。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述原花青素為食品級原花青素；所述包含原花青素的原料選自包含原花青素的植物油和包含原花青素的食品添加劑中的一種或多種，優(yōu)選為冷榨葡萄籽油。

6.一種檢測經(jīng)烹飪和/或熱回收處理的根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的食用油的方法，該方法包括以下步驟：

（1）測定食用油中實際原花青素濃度（P_T）及實際花青素濃度（A_T）；和

（2）分別比較實際原花青素濃度（P_T）與理論原花青素濃度（P_E）、實際花青素濃度（A_T）與理論花青素濃度（A_E），并分別計算實際原花青素濃度（P_T）與實際花青素濃度（A_T）的比值、理論原花青素濃度（P_E）與理論花青素濃度（A_E）的比值，判定所述食用油是否經(jīng)烹飪和/或熱回收處理。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）中的測定方法為比色法、薄層色譜法或高效液相色譜法，優(yōu)選為高效液相色譜法。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的條件包括：

色譜柱為采用十八烷基硅烷鍵合硅膠填料的反相色譜柱；柱溫為35℃；紫外檢測波長為525nm；流動相為體積比為73：13：6：8的水、甲醇、異丙醇和10%甲酸水溶液的混合流動相；流動相流速為1.0ml/分鐘。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法包括以下步驟：

（1）樣品提取

依據(jù)待測物中理論原花青素濃度確定樣品采集量，使其理論含量為800μg，向該待測物樣品加入等量無水甲醇，充分震蕩混合后離心或靜置分層，吸取甲醇部分為樣品提取液，將樣品提取液定容至10ml；若樣品提取液體積大于10ml，則用真空或加熱法濃縮；

（2）提取回收率參考品

取與上述采集量相同的待測物樣品，分別投放與理論原花青素濃度和理論花青素濃度相當(dāng)?shù)脑ㄇ嗨丶兤泛突ㄇ嗨丶兤罚宰鳛樘崛』厥章蕝⒖计罚徊⑴c上述樣品同樣處理，得到提取回收率參考液；

（3）制備濃度參考品

原花青素濃度參考品：取7管10ml無水甲醇，加入原花青素純品的甲醇母液，使其濃度分別為0、5、10、20、40、80、160μg/ml；

花青素濃度參考品：取7管10ml無水甲醇，加入花青素純品的甲醇母液，使其濃度分別為0、0.625、1.25、2.5、5、10、20μg/ml；

（4）原花青素水解

取1ml上述樣品提取液、提取回收率參考液及原花青素濃度參考品，分別加入6.0ml體積比為95：5的正丁醇和12mol/L鹽酸的混合液及0.2ml?2%硫酸鐵銨的2mol/L鹽酸溶液，密閉加熱至100℃持續(xù)45分鐘，冷卻備用；

（5）色譜條件

色譜柱為采用十八烷基硅烷鍵合硅膠填料的反相色譜柱；柱溫為35℃；紫外檢測波長為525nm；流動相為體積比為73：13：6：8的水、甲醇、異丙醇和10%甲酸水溶液的混合流動相；流動相流速為1.0ml/分鐘；

（6）檢測與結(jié)果計算

a.?樣品提取液及提取回收率參考液中的總花青素濃度

以經(jīng)過上述水解步驟后的原花青素濃度參考品為標(biāo)準(zhǔn)，檢測經(jīng)上述水解步驟后的樣品提取液及提取回收率參考液，分別得到其總花青素濃度；

b.?樣品提取液及提取回收率參考液中的花青素濃度

未經(jīng)上述水解步驟的樣品提取液、提取回收率參考液以及花青素濃度參考品中加入終濃度為1%的甲酸后分別檢測，從而得到其花青素濃度；若提取液或提取回收率參考液的測值超過參考品范圍，稀釋5~10倍后再測定；

c.?樣品提取液及提取回收率參考液中的原花青素濃度

提取液及參考液中原花青素濃度＝總花青素濃度－花青素濃度

d.?樣品及提取回收率參考品中原花青素表觀濃度和花青素表觀濃度

表觀濃度＝提取液或參考液中濃度÷樣品采集的毫升數(shù)×10

e.?原花青素提取回收率和花青素提取回收率

回收率＝（提取回收率參考品表觀濃度－樣品表觀濃度）÷投放濃度×100%

f.?樣品中原花青素實際濃度和花青素實際濃度

實際濃度＝表觀濃度÷回收率。