[發明專利]灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201210452706.2
• 申請日: 2012-11-13
• 公開（公告）號: CN103131537A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 郭國寧;張耀華;陳義坤;岳海波;劉冰
• 申請（專利權）人: 湖北中煙工業有限責任公司;武漢市黃鶴樓科技園有限公司
• 主分類號: C11B9/00
• 分類號: C11B9/00;A24B15/20
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 馬輝

1.一種灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油的制備方法，包括以下步驟：

1）將灰樹花子實體在無菌條件下從菌柄部位剪取小塊組織片段，接種于分離瓊脂平板，在溫度28℃靜置培養7天，待菌絲長滿平板后，在無菌條件下用接種鉤挑取帶有菌絲的瓊脂3-5塊，接種至種子培養基，在溫度28℃，轉速150r/min條件下，培養7d，得到灰樹花接種物；

2）按體積比5~15%將灰樹花接種物接種于發酵培養基，在溫度26~30℃，通氣量為0.8~1.0dm³/min，轉速120~150r/min條件下，培養4~7d，進行深層發酵，獲得灰樹花菌絲體發酵產物；

3）按體積比1∶1~3將灰樹花菌絲體發酵產物，加入蒸餾萃取裝置一端容器中，裝置的另一端容器中按體積比1∶1~3裝有二氯甲烷，50~60℃水浴加熱，同時蒸餾萃取4~8h，得到提取液；

4）將步驟3）中提取液真空濃縮至體積不再發生變化，溶劑全部揮發時停止濃縮，用無水硫酸鈉進行干燥，放置2~5h小時后過濾，即得到灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油。

2.根據權利要求1所述的灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油的制備方法，其特征在于：所述的步驟1）中，分離瓊脂平板配方為：馬鈴薯：200g/L，蔗糖：20g/L，瓊脂粉：30g/L。

3.根據權利要求1所述的灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油的制備方法，其特征在于：所述的步驟1）中，種子培養基配方為：馬鈴薯：200g/L，蔗糖：20g/L。

4.根據權利要求1所述的灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油的制備方法，其特征在于：所述的步驟1）中，發酵培養基的配方為：馬鈴薯：200g/L，麩皮8g/L，蔗糖20g/L，硫酸錳2.5g/L，硫酸鎂1.5g/L。

5.一種根據權利要求1所述的灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油的應用，其特征在于：所述的灰樹花深層發酵的菌絲體揮發油作為天然煙草添加劑加入重組煙葉中，加入重組煙葉中質量比為0.01～0.5‰。