[發(fā)明專利]用于發(fā)酵生產(chǎn)L-賴氨酸的重組DNA、菌株及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210450748.2
• 申請日: 2012-11-12
• 公開（公告）號: CN103215286A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發(fā)明（設計）人: 張偉國;宋燦輝;錢和
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N15/53;C12N15/60;C12N15/63;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/19
• 代理公司: 蘇州慧通知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 32239
• 代理人: 丁秀華

1.用于發(fā)酵生產(chǎn)L-賴氨酸的重組DNA，其特征在于：包括解除了L-賴氨酸對天冬氨酸激酶III和二氫吡啶二羧酸合酶反饋抑制的編碼天冬氨酸激酶III和二氫吡啶二羧酸合酶的DNA序列、編碼天冬氨酸-β-半醛脫氫酶的DNA序列、編碼二氨基庚二酸脫氫酶的DNA序列以及編碼磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的DNA序列。

2.如權利要求1所述的用于發(fā)酵生產(chǎn)L-賴氨酸的重組DNA，其特征在于，所述解除了L-賴氨酸對天冬氨酸激酶III的反饋抑制的天冬氨酸激酶III，從N端開始計算，該天冬氨酸激酶III催化亞基的第318位氨基酸由蛋氨酸變?yōu)楫惲涟彼幔?23位氨基酸由甘氨酸變?yōu)樘於彼幔徊⑶以摱溥拎ざ人岷厦刚{(diào)節(jié)亞基的第118位氨基酸由組氨酸變?yōu)槔野彼帷?/p>

3.如權利要求1所述的用于發(fā)酵生產(chǎn)L-賴氨酸的重組DNA，其特征在于，所述天冬氨酸-β-半醛脫氫酶來源于大腸桿菌的編碼天冬氨酸-β-半醛脫氫酶。

4.如權利要求1所述的用于發(fā)酵生產(chǎn)L-賴氨酸的重組DNA，其特征在于，所述磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶來源于大腸桿菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶。

5.如權利要求1所述的用于發(fā)酵生產(chǎn)L-賴氨酸的重組DNA，其特征在于，所述二氨基庚二酸脫氫酶來源于棒狀桿菌的二氨基庚二酸脫氫酶。

6.包含如權利要求1-5中任一項所述重組DNA的表達質(zhì)粒pWG-aACPD。

7.一種大腸桿菌，其特征在于，它包含如權利要求1-5中任一項所述的重組DNA。

8.一種大腸桿菌，其特征在于，其特征在于，它是導入如權利要求1-5中任一項所述的重組DNA或如權利要求6所述的表達質(zhì)粒pWG-aACPD而轉(zhuǎn)化過的。

8.如權利要求7或8所述大腸桿菌在發(fā)酵生產(chǎn)L-賴氨酸工藝中的應用。

9.一種生產(chǎn)L-賴氨酸的方法，其特征在于，包括在發(fā)酵培養(yǎng)基中對如權利要求7或8所述的大腸桿菌進行培養(yǎng)以生產(chǎn)L-賴氨酸。

10.根據(jù)權利要求9所述生產(chǎn)L-賴氨酸的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)溫度在37℃，培養(yǎng)時間在48h以上。