[發明專利]柑橘生物類黃酮中橙皮甙含量的測定方法有效
| 申請號: | 201210450121.7 | 申請日: | 2012-11-13 |
| 公開(公告)號: | CN103091408A | 公開(公告)日: | 2013-05-08 |
| 發明(設計)人: | 朱偉;包亞君;張沛霞 | 申請(專利權)人: | 江蘇艾蘭得營養品有限公司 |
| 主分類號: | G01N30/02 | 分類號: | G01N30/02 |
| 代理公司: | 靖江市靖泰專利事務所 32219 | 代理人: | 陸平 |
| 地址: | 215400 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 柑橘 生物 類黃酮 橙皮 含量 測定 方法 | ||
1.柑橘生物類黃酮中橙皮甙含量的測定方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)、稀釋溶液的制備:?取20mmol/l的氫氧化鈉溶液和50%甲醇溶液按(0.5~1.5:1.5~0.5)比例混合均勻;
(2)、對照品溶液的制備:精密稱取橙皮甙和柚皮甙對照品適量,加稀釋溶液制成橙皮甙和柚皮甙濃度均為0.10mg/ml的對照品溶液;
(3)、供試品溶液的制備:精密稱取10-15mg樣品于100ml容量瓶中,加入80ml稀釋溶液,60~70℃超聲10-20min,取出,冷卻至室溫后,用稀釋溶液定容至刻度,取部分溶液用0.45μm微孔濾膜過濾后備用;
(4)、確定色譜條件:色譜柱:C18色譜柱,4.6mm×250mm,5μm;流動相和梯度:流動相用0.45μm微孔濾膜過濾后,脫氣;流動相A:0.1%三氟乙酸水溶液;流動相B:0.1%三氟乙酸的甲醇-乙腈1:1溶液;梯度洗脫時間見圖1;柱溫:35℃?;流速:1ml/min?;?檢測波長:292nm;保留時間:柚皮苷約?17.6min?;?橙皮甙約?18.0min;
(5)、檢驗程序:
????分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl,注入液相色譜儀,測定,在規定條件下,每針運行時間應三倍于橙皮甙的保留時間;
系統適應性條件:完全分離兩種系統適應性物質,柱效應達到:理論塔板數大于2000,橙皮甙和柚皮甙的分離度大于1.5;
通過測得數據計算橙皮甙含量??橙皮甙%=A樣×C對×100/A對×W樣×100%??式中:C對:橙皮甙標準工作溶液濃度mg/ml;A樣:樣品峰面積;A對:橙皮甙標準工作溶液峰面積平均值;W樣:樣品的質量mg。
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