[發(fā)明專利]檢測小麥籽粒脂肪氧化酶活性的引物及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210447260.4
• 申請(qǐng)日: 2012-11-09
• 公開（公告）號(hào): CN102925576A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚大年;吳萍;司紅起;張文明;鄭文寅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11;A01G1/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

1.檢測小麥脂肪氧化酶活性的引物對(duì)，為由序列表中序列1所示的單鏈DNA和序列2所示的單鏈DNA組成的引物對(duì)。

2.權(quán)利要求1所述的引物對(duì)在檢測小麥脂肪氧化酶活性中的應(yīng)用。

3.一種檢測小麥脂肪氧化酶活性的方法，包括如下步驟：

（1）以待測小麥的基因組DNA為模板，以權(quán)利要求1所述引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得PCR產(chǎn)物；

（2）檢測步驟（1）所得PCR產(chǎn)物的大小，按照如下方法確定所述待測小麥的脂肪氧化酶活性：若所述PCR產(chǎn)物中含有大小為677bp的DNA片段，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性高的小麥或候選為脂肪氧化酶活性高的小麥；若所述PCR產(chǎn)物中不含有大小為677bp的DNA片段，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性低的小麥或候選為脂肪氧化酶活性低的小麥。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述檢測步驟（1）所得PCR產(chǎn)物的大小的方法是將所述PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，若所述PCR產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠電泳上顯示677bp之間的一個(gè)條帶，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性高的小麥或候選為脂肪氧化酶活性高的小麥；若所述PCR產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠電泳上不顯示677bp之間的一個(gè)條帶，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性低的小麥或候選為脂肪氧化酶活性低的小麥。

5.一種檢測小麥脂肪氧化酶活性的方法，包括如下步驟：

（1）以待測小麥的基因組DNA為模板，以權(quán)利要求1所述引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得PCR產(chǎn)物；

（2）檢測步驟（1）所得PCR產(chǎn)物的大小，按照如下方法確定所述待測小麥的脂肪氧化酶活性：若所述PCR產(chǎn)物為大小分別是475bp、677bp和786bp的三個(gè)DNA片段，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性高的小麥或候選為脂肪氧化酶活性高的小麥；若所述PCR產(chǎn)物中為大小分別是475bp和786bp的兩個(gè)DNA片段，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性低的小麥或候選為脂肪氧化酶活性低的小麥。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述檢測步驟（1）所得PCR產(chǎn)物的大小的方法是將所述PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，若所述PCR產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠電泳上同時(shí)顯示大小為475bp、677bp和786bp的三個(gè)條帶，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性高的小麥或候選為脂肪氧化酶活性高的小麥；若所述PCR產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠電泳上同時(shí)顯示大小為475bp和786bp的兩個(gè)條帶，則所述待測小麥為脂肪氧化酶活性低的小麥或候選為脂肪氧化酶活性低的小麥。

7.權(quán)利要求1所述的引物對(duì)或權(quán)利要求3-6中任一所述的方法在如下（a）-（f）中的應(yīng)用：

（a）篩選脂肪氧化酶活性高的小麥品種；

（b）篩選脂肪氧化酶活性低的小麥品種；

（c）篩選耐儲(chǔ)藏小麥品種；

（d）培育脂肪氧化酶活性高的小麥品種；

（e）培育脂肪氧化酶活性低的小麥品種；

（f）培育耐儲(chǔ)藏小麥品種。

8.培育耐儲(chǔ)藏小麥品種的方法，包括采用通過權(quán)利要求3-6中任一所述方法檢測得到的所述脂肪氧化酶活性低的小麥品種作為親本進(jìn)行育種的步驟。