[發明專利]一種檢測人外周血淋巴細胞所受電離輻射劑量的方法無效
| 申請號: | 201210444252.4 | 申請日: | 2012-11-09 |
| 公開(公告)號: | CN103805682A | 公開(公告)日: | 2014-05-21 |
| 發明(設計)人: | 劉青杰;張慶召;張德欽;高玲;封江彬 | 申請(專利權)人: | 中國疾病預防控制中心輻射防護與核安全醫學所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12Q1/02;G01N21/64 |
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| 地址: | 100088 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 檢測 人外周血 淋巴細胞 電離輻射 劑量 方法 | ||
1.一種檢測人外周血淋巴細胞所受電離輻射劑量的方法,其特征包括如下步驟:
(1)、根據淋巴細胞pig3基因表達序列設計引物和Taqman-MGB探針,構建含有淋巴細胞pig3基因表達序列的重組載體作為標準物質;
(2)、以步驟(1)所述引物和Taqman-MGB探針對10倍系列稀釋的標準物質進行實時熒光PCR,繪制絕對定量標準曲線;
(3)、將正常人外周血中分離的淋巴細胞分組接受不同劑量的電離輻射,按照步驟(2)所述實時熒光PCR的方法對輻射后不同培養時間淋巴細胞pig3基因的表達水平定量測定,獲得輻射劑量和pig3基因表達水平的擬合劑量效應曲線;
(4)、按照步驟(2)所述實時熒光PCR的方法對待測輻射劑量的人外周血淋巴細胞pig3基因的表達水平定量測定,根據步驟(3)所述的擬合劑量效應曲線計算待測淋巴細胞所受的電離輻射劑量。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)所述的淋巴細胞pig3基因表達序列如SEQ?ID?NO:1所示。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)所述引物的上游引物如SEQ?ID?NO:2,下游引物如SEQID?NO:3。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)所述Taqman-MGB探針含有如SEQ?ID?NO:4所示的堿基序列。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)所述Taqman-MGB探針熒光基團為FAM,淬滅基團為NFQ。
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