[發明專利]一種綜合利用Cohn組分IV的方法

有效

• 申請號: 201210438973.4
• 申請日: 2012-11-06
• 公開（公告）號: CN102977180A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發明（設計）人: 蘇志國;李巖;楊延麗;于孟冉
• 申請（專利權）人: 中國科學院過程工程研究所
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/18;C07K1/20;C07K1/22;C07K1/16;C07K1/34;C07K14/47;C07K14/79;C07K14/765;C07K14/775;C07K14/81;C07K16/06;C12N9/02
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種綜合利用組分IV的方法，其特征在于，所述方法包括步驟a：將Cohn低溫乙醇法獲得的組分IV溶液I溶解，分離沉淀，獲得上清I和沉淀I，將所述沉淀I溶液II溶解，分離沉淀，獲得上清II和沉淀II，再將所述沉淀II溶液III溶解，分離沉淀，獲得上清III；

其中，優選地，所述溶液I為酸性緩沖溶液，pH值為優選地3.8-5.2、更優選地4.1-4.8、最優選地4.3-4.5，濃度為優選地0.01M-0.5M、更優選地0.01-0.2M、最優選地0.02-0.05M，所述溶液II為中性緩沖溶液，pH值為優選地6.0-7.5、更優選地6.3-7.2、最優選地6.5-7.0，濃度為優選地0.01M-0.5M、更優選地0.01-0.2M、最優選地0.02-0.05M和/或所述溶液III為堿性緩沖溶液，pH值為優選地8.0-9.5、更優選地8.3-9.2、最優選地8.5-9.0，濃度為優選地0.01M-0.5M、更優選地0.01-0.2M、最優選地0.02-0.05M，且優選地，所述酸性緩沖溶液的緩沖體系包括但不限于醋酸-醋酸鈉體系和檸檬酸-檸檬酸鈉體系、所述中性緩沖溶液的緩沖體系包括但不限于磷酸鹽緩沖體系和Tris-HCl緩沖體系和/或所述堿性緩沖溶液的緩沖體系包括但不限于Tris-HCl緩沖體系和硼酸-硼砂緩沖體系；

優選地，所述組分IV與所述溶液I、所述溶液II和所述溶液III的質量比分別為1:500-1:1，更優選地1:100-1:2，最優選地1:10-1:4，

優選地，所述分離通過離心來進行，

優選地，所述步驟a在0-4℃下進行。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括步驟b：將上清I經由離子交換層析柱分離，收集穿透峰，獲得組分A，之后用洗脫緩沖液I洗脫，獲得組分B，最后用洗脫緩沖液II洗脫，獲得α₂-巨球蛋白，其中，分離過程中所用的平衡緩沖液為平衡緩沖液I；

其中，優選地，所述平衡緩沖液I的緩沖體系包括但不限于醋酸-醋酸鈉體系或者檸檬酸-檸檬酸鈉體系，pH值為3.5-5.2、優選地3.8-5.0、更優選地4.1-4.9、最優選地4.2-4.6，濃度為5-200mM、優選地10-100mM、更優選地20-40mM，

優選地，所述洗脫緩沖液I為在所述平衡緩沖液I中加入包括但不限于NaCl、KCl、NaBr、KBr和MgCl₂，優選地NaCl、KCl和NaBr，更優選地NaCl的另外的鹽，所述洗脫緩沖液I的鹽濃度為0.05-0.15M、優選地0.08-0.12M、更優選地0.1M，

優選地，所述洗脫緩沖液II為在所述平衡緩沖液I中加入包括但不限于NaCl、KCl、NaBr、KBr和MgCl₂，優選地NaCl、KCl和NaBr，更優選地NaCl的另外的鹽，所述洗脫緩沖液II的鹽濃度為0.18-0.35M、優選地0.2-0.3M、更優選地0.25M，

優選地，所述離子交換層析介質包括但是不限于中國科學院過程工程研究所生產的的DEAE以及Q瓊脂糖介質，或者GE公司的DEAE?Sepharose?FF、Q?Sepharose?FF、ANX?Sepharose?FF?high?sub、ANX?Sepharose?FF?low?sub、QSepharoseXL、Capto?DEAE以及Capto?Q。