[發明專利]一種附著有高誘導活性底棲硅藻膜的海參幼體附著基及其制作方法

無效

• 申請號: 201210438894.3
• 申請日: 2012-11-05
• 公開（公告）號: CN102870723A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 包衛洋;楊美圓;孫景春;張力;封克
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00;A01G31/00
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

技術領域

本發明屬于海水養殖領域，特別是涉及一種附著有高誘導活性底棲硅藻膜的海參幼苗附著基及其制作方法。

背景技術

海參幼體由浮游狀態的樽形幼體變為附著狀態的五觸手幼體的附著變態過程是海參發育過程中最為重要的環節，同時也是海參育苗成功與否的關鍵所在。海參幼體要實現附著變態，附著基是不可缺少的重要條件。現在普遍使用的附著基主要是聚乙烯波紋板、聚乙烯網片等，同時有關海參幼體附著基的專利也有很多，例如專利號為ZL200720013117.9的海參幼體附著基等。目前，海參苗種生產中幼體的低附著變態率問題嚴重制約了海參養殖業的發展，而附著基作為幼體附著變態的依托是影響海參養殖業效率提高的重要因素。

但是現在絕大部分苗種生產者仍習慣單獨使用聚乙烯波紋板或網片等附著基，海參幼體在其上的附著變態率較低，一般為20%左右,嚴重影響刺參業的發展。而對于具有誘導作用的底棲硅藻使用較少，這主要是由于難以確定高誘導活性的底棲硅藻種類。現在尚未出現一種具有高誘導活性的底棲硅藻進行優化的高附著變態率的海參幼體附著基。

發明內容

本發明的目的是提供一種海參幼體附著基及其制作方法。

所述海參幼體附著基包括附著基基質，在基質上有高誘導活性底棲硅藻膜。所述基質可以是聚乙烯波紋板或網片等常規附著基質。所述高誘導活性底棲硅藻使海參幼體的附著率>80%。

上述海參幼體附著基通過下述步驟制備：

（1）高誘導活性底棲硅藻株的篩選。

從海參養殖池塘以及海水中巖石等表面采集微生物膜，利用常規的固體底棲硅藻培養基（f/2培養基，外加1.5%的瓊脂）進行劃板培養48小時，通過顯微鏡觀察對形成單克隆的藻株進行二次劃板，最終分離出單細胞底棲硅藻株。

利用常規的f/2液體培養基培養分離的底棲硅藻，離心濃縮后分別讓底棲硅藻在培養皿中形成硅藻膜。利用海參幼體的附著率（>80%）檢測出高誘導活性的底棲硅藻株。

（2）底棲硅藻的規模化培養技術。

向育苗池塘內接種已篩選的高活性底棲硅藻，添加常規的f/2硅藻培養基在充氣的情況下對硅藻進行連續大規模培養，5-7天后使其處于指數生長期，密度達到百萬級水平。

（3）附著基的預處理技術。

將聚乙烯波紋板或網片等常規附著基浸于次氯酸鈉水溶液中浸泡1-2天，采用自來水沖洗1-2次，再利用育苗用的海水沖洗3次，去除聚乙烯波紋板或網片等表面的污染物，以及殘留的次氯酸鈉，保證附著基的清潔。

（4）利用高誘導活性底棲硅藻優化附著基技術。

將處理過的清潔附著基投入到硅藻培養池中，停止充氣，48-72小時后底棲硅藻將附著在附著基表面，并生長形成底棲硅藻膜。排放掉育苗池中的f/2硅藻培養基并用育苗用水沖洗育苗池，然后將育苗池加滿海水即可。

本技術專利有效地解決了刺參苗種生產中幼體附著變態率低的技術瓶頸：能夠有效提高海參幼體的附著率50%以上，同時底棲硅藻作為稚參的食物來源可以保障稚參的后期生長；幼體附著率的提高可以避免苗種生產過程中抗生素的添加，達到清潔生產的效果；底棲硅藻的規模化培養技術與硅藻膜的形成技術要求相對簡單，苗種生產企業完全可以實現；通過專利相關技術的實施，海參育苗企業的利潤能夠提高50%以上，因此市場實施可能性大，經濟效益高。

附圖說明

圖1是高誘導活性的底棲硅藻株篩選示意圖。

圖2是兩種附著基的附著對比。

具體實施方式

本發明中用于硅藻培養的培養基選用常規培養基即可。

實施例1.本發明附著基的制備。

本專利的主要實施步驟分為：（1）高誘導性底棲硅藻株的篩選；（2）底棲硅藻的規模化培養；（3）附著基的預處理;（4）利用高誘導活性底棲硅藻膜優化附著基。

（1）高誘導活性底棲硅藻株的篩選技術。

從海參養殖池塘以及海水中的巖石等表面采集微生物膜，離心得到沉淀物，多次添加滅菌海水離心后，利用常規的底棲硅藻固體培養基（f/2培養基，外加1.5%的瓊脂）進行劃板培養48小時，通過顯微鏡觀察對形成單克隆的藻株進行二次劃板，最終分離出單細胞底棲硅藻株。

將分離的單細胞硅藻接種到常規的f/2液體培養基中培養7天，刮取附著生長的底棲硅藻，離心濃縮后分別讓底棲硅藻在培養皿中形成硅藻膜。向培養皿中加入海參成熟幼體，48-72小時后，顯微鏡下觀察幼體的附著率。利用幼體的附著率（>80%）檢測出具有高誘導活性的底棲硅藻株。