[發(fā)明專利]一種從油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210437880.X
• 申請日: 2012-11-06
• 公開（公告）號: CN102965422A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王仁寬
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽新世界綠洲茶油有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/16
• 代理公司: 安徽合肥華信知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34112
• 代理人: 余成俊

技術(shù)領(lǐng)域

???本發(fā)明涉及油茶籽加工領(lǐng)域，具體涉及一種從油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法。

背景技術(shù)

油茶系山茶科山茶屬植物，是我國重要的油料作物。我國有豐富的油茶資源，年產(chǎn)油茶籽120余萬噸。油茶籽榨油后餅粕中含有約12%～15%的蛋白質(zhì)，其利用率相當(dāng)?shù)停斐少Y源的極大浪費(fèi)。植物蛋白質(zhì)在生物酶法條件下，水解生成的多肽及氨基酸等物質(zhì)，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值與功能特性，因此該法已成為研究熱點(diǎn)。很多種植物蛋白質(zhì)酶解后產(chǎn)生的多肽除了具有易被人體消化吸收的特性外，還具有很強(qiáng)的抗氧化、降低膽固醇等功能特性。到目前為止，未見國內(nèi)外有關(guān)油茶籽多肽的研究報(bào)道。因此，開展對油茶籽多肽保健功能活性的研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。?

發(fā)明內(nèi)容

??本發(fā)明提供了一種從油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法。實(shí)現(xiàn)資源的充分利用，變廢為寶，減少污染的綠色經(jīng)濟(jì)目的。

???為實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種油茶籽蛋白中提取油茶籽多肽的方法，其特征在于，其提取工藝路線為：油茶籽蛋白→粉碎→過篩→加水得懸浮液→熱變性處理?→調(diào)pH值→復(fù)合酶酶解→滅酶→離心→取上清液→樹脂脫鹽→SephadexG-25柱層析→離心→取上清液冷凍干燥→油茶籽多肽，具體包括以下步驟：

（1）將油茶籽蛋白粉碎，按底物濃度?2.8-3.0%，加水混合，90℃熱變性處理15-20?min后降溫至60℃以下，先調(diào)節(jié)PH值為5.5-6.0，靜置3-4小時(shí)，再調(diào)節(jié)PH為8.0-8.5，靜置3-4小時(shí)；然后再調(diào)節(jié)pH值為7.0，按每克底物向其中加入4000-5000?u的中性蛋白酶和4000-5000?u的木瓜蛋白酶，在53-54℃攪拌酶解2-3h，酶解后將溫度升至80-85℃滅酶4-6min，然后用轉(zhuǎn)速為3000-4000r/min的離心機(jī)離心分離10-15min，取上清液；

（2）上清液采用樹脂柱脫鹽，過濾，得濾液；

（3）?所得濾液用SephadexG-25柱層析，以蒸餾水為洗脫液，洗脫速度為?0.3ml/min，得層析液；

（4）然后離心分離層析液；

（5）取上清液冷凍干燥得到油茶籽多肽。?

所述的從油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法，其特征在于：步驟（1）所述的底物濃度2.9%。

所述的從油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法，其特征在于：步驟（1）的酶解溫度為53.4℃。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明采用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶復(fù)合酶酶解處理，縮短了酶解時(shí)間，降低了能耗，同時(shí)也提高了茶籽多肽的提取率，由原來的56.8%提高到78%，實(shí)現(xiàn)了變廢為寶，低能耗、低污染的目的。

具體實(shí)施方式

??將油茶籽蛋白粉碎后過80目篩，按底物濃度?2.9%，加水混合，90℃熱變性處理20?min后降溫至60℃以下，先調(diào)節(jié)PH值為5.5，靜置3小時(shí)，再調(diào)節(jié)PH為8.5，靜置4小時(shí)；然后再調(diào)節(jié)pH值為7.0，按每克底物向其中加入4364.1?u的中性蛋白酶和5000?u的木瓜蛋白酶，在53.4℃攪拌酶解3h，酶解后將溫度升至85℃滅酶6min，然后用轉(zhuǎn)速為4000r/min的離心機(jī)離心分離15min，取上清液；上清液采用樹脂柱脫鹽，過濾，得濾液；所得濾液用SephadexG-25柱層析，以蒸餾水為洗脫液，洗脫速度為?0.3ml/min，得層析液；然后離心分離層析液；取上清液冷凍干燥得到油茶籽多肽。

經(jīng)檢測，得知，12000Da～5000Da?的多肽分子占?6%，5000Da～1300Da?之間的多肽分子占?24%，1300Da～600Da?之間多肽分子占?36%，600Da～300Da?之間多肽分子占?5%，小于300Da多肽分子占6%，氨基酸占9.3%。