[發明專利]一種快速測定真菌微生物農藥中活孢子含量的方法

無效

• 申請號: 201210434841.4
• 申請日: 2012-11-05
• 公開（公告）號: CN102899386A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: 袁善奎;姜輝;崔曉嵐;王一喆;林榮華;瞿唯鋼;胡承勇;曲甍甍;周艷明
• 申請（專利權）人: 農業部農藥檢定所
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速測定真菌微生物農藥中活孢子含量的方法，包括下列步驟：

(1)在真菌培養基中加入以重量計0.25‰～5‰的脫氧膽酸鈉，并制備成平板；

(2)將真菌微生物農藥樣品在含重量百分比0.05％～0.1％吐溫20或0.05％～0.1％聚乙二醇辛基苯基醚的滅菌水中浸泡20～40min，再振蕩20～40min；

(3)將步驟(2)處理后的樣品進行倍數梯度稀釋，分別將不同稀釋度的樣品均勻涂布在步驟(1)獲得的平板上，室溫下培養48～120h，其中，同一稀釋度制作至少2個重復樣品；

(4)統計各平板上的菌落數，其中菌落數在30個～300個的平板為有效計數平板；

(5)真菌微生物農藥中，活孢子的含量為：

C＝T×N×10，

式中：C是真菌農藥活孢子含量，單位為CFU/g；T是統計平板對應的稀釋倍數；N是同一稀釋倍數的多個有效計數平板上的平均菌落數。

2.根據權利要求1所述的快速測定真菌微生物農藥中活孢子含量的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述真菌培養基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基，將培養基高壓蒸汽滅菌，待冷卻到55～62℃時，向培養基中加入脫氧膽酸鈉，制備成平板。

3.根據權利要求1所述的快速測定真菌微生物農藥中活孢子含量的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述振蕩在室溫、150rpm的條件下進行。

4.根據權利要求1或3所述的快速測定真菌微生物農藥中活孢子含量的方法，其特征在于：步驟(2)中，浸泡時間為30min，振蕩時間為30min。

5.根據權利要求1所述的快速測定真菌微生物農藥中活孢子含量的方法，其特征在于：步驟(3)中，采用10倍數梯度稀釋，同一稀釋度制作3個重復樣品。