[發明專利]制備型高效液相色譜法制備EPA的方法

無效

• 申請號: 201210430958.5
• 申請日: 2012-11-02
• 公開（公告）號: CN103787863A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 張大兵;張寧;羅軍俠;劉玉明;李勝迎
• 申請（專利權）人: 江蘇漢邦科技有限公司
• 主分類號: C07C57/03
• 分類號: C07C57/03;C07C51/47
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

??本發明涉及的是動態軸向壓縮柱分離純化EPA的方法，具體是采用動態軸向壓縮制備柱進行分離純化EPA的方法。?

背景技術

???二十碳五烯酸（EPA），化學名稱為5、8、11、14、17-全順-二十碳五烯酸，屬于ω-3?系列不飽和脂肪酸，是人體重要不飽和脂肪酸，具有重要的生理活性功能，在治療和防治心腦血管疾病、炎癥、抑制腫瘤以及預防老年癡呆等方面具有良好的療效。二十碳五烯酸的開發應用已受到世界各國科學家的關注與重視。傳統的分離方法有有機溶劑萃取、高效液相層析等，最近又有尿素包合法、真空蒸餾法、分子蒸餾法、低溫結晶法以及超臨界流體分離法，這些方法中大多存在著產品純度低、成本高、工藝復雜等缺點。?

????隨著制藥、生物化工等行業的迅速發展，制備型液相色譜分離技術得到越來越廣泛的開發和應用，已成為分離和純化復雜混合物的重要方法，尤其適用于天然產物的分離。動態軸向壓縮(DAC)法具有多方面的優越性，因而得到了更為深入的研究和發展。動態軸向壓縮柱的核心技術是通過活塞的上下運動來裝柱、維持柱壓和卸柱，簡化了大直徑色譜柱的填卸過程，填裝的色譜柱性能穩定、效率高。DAC柱柱效高，重復性好，填裝所用的時間短，可以采用粒徑更小的填料，減小柱長，增加柱徑，從而減小管壁效應，得到幾乎接近分析柱的柱效。?

????本發明采用反相動態軸向壓縮柱制備色譜法分離純化了EPA，分離工藝簡單，提取率高，所得產品純度高，無污染，適用于大規模的工業化生產。?

發明內容

本發明的目的是提供一種用動態軸向壓縮柱分離純化EPA的生產方法，包括樣品溶解、動態軸向壓縮柱分離、重結晶以及成品的純度檢測。?

本發明為實現上述發明目的采用如下步驟：?

????a、樣品的溶解：EPA粗品用甲醇溶解，過濾，備用；????

b、流動相的配制：流動相采用甲醇與水的混合溶劑，甲醇的濃度為80-95%之間；

????c、DAC柱分離：用進樣泵向填裝好填料的動態軸向壓縮柱中泵入上述溶解的樣品溶液，再用步驟b配制好的流動相洗脫，收集目標成分，取樣HPLC檢測；

????d、濃縮：將c步驟中收集到的目標組分進行濃縮處理，得到EPA純品；

?e、成品的純度檢測：泵：NewstyleNP7000型泵；色譜柱(ODS填料4.6*250mm，5μm)；檢測器：漢邦紫外檢測器NewstyleNU3000，檢測波長：210nm，檢測溫度：室溫；流動相：甲醇:水=90:10，流速：1.0mL/min

具體實施方式

實施方案一?

1、樣品的溶解：EPA粗品用甲醇溶解，濃度為200g/mL，過濾，備用；???

2、流動相的配制：流動相為甲醇：水=87:13；?

3、DAC柱分離：用進樣泵向填裝好粒徑為20um填料的動態軸向壓縮柱(50*500mm)中泵入樣品溶液，進樣流速為60mL/min，用流動相洗脫，流速為100mL/min，收集目標成分，取樣HPLC檢測；

4、濃縮：將收集到的目標組分進行濃縮處理，得到EPA純品，經HPLC檢測純度為98.8%。

??

實施方案二

1、樣品的溶解：EPA粗品用甲醇溶解，濃度400g/mL，過濾，備用；???

2、流動相的配制：流動相為甲醇：水=88:12；?

3、DAC柱分離：用進樣泵向填裝好粒徑為20um填料的動態軸向壓縮柱(50*500mm)中泵入樣品溶液，進樣流速為60mL/min，用流動相洗脫，流速為100mL/min，收集目標成分，取樣HPLC檢測；

4、濃縮：將收集到的目標組分進行濃縮處理，得到EPA純品，經HPLC檢測純度為98.5%。

??

實施方案三

1、樣品的溶解：EPA粗品用甲醇溶解，濃度為500g/mL，過濾，備用；???

2、流動相的配制：流動相為甲醇：水=88:12；?

3、DAC柱分離：用進樣泵向填裝好粒徑為20um填料的動態軸向壓縮柱(50*500mm)中泵入樣品溶液，進樣流速為60mL/min，用流動相洗脫，流速為80mL/min，收集目標成分，取樣HPLC檢測；

4、濃縮：將收集到的目標組分進行濃縮處理，得到EPA純品，經HPLC檢測純度為98.6%。

??