[發(fā)明專利]三芐糖苷的模擬移動床拆分方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210425229.0
• 申請日: 2012-10-31
• 公開（公告）號: CN103788145A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張宇;王亞輝;居延娟
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇漢邦科技有限公司
• 主分類號: C07H15/18
• 分類號: C07H15/18;C07H1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種光學(xué)異構(gòu)體的拆分技術(shù)，特別是三芐糖苷的模擬移動床色譜分離方法。

背景技術(shù)

三芐糖苷(Tribenoside,TBS)，即乙基-3,5,6-三芐氧基-D-呋喃葡萄糖苷，由兩種光學(xué)異構(gòu)體α體(α-乙基-3,5,6-三芐氧基-D-呋喃葡萄糖苷）和β體(β-乙基-3,5,6-三芐氧基-D-呋喃葡萄糖苷)組成的混合物。它具有抗炎、抗毒素、增強(qiáng)毛細(xì)血管韌力、保護(hù)創(chuàng)傷組織并促使其愈合的作用及較弱的鎮(zhèn)痛作用，與神經(jīng)鞘氨醇合用可預(yù)防性地對抗革蘭氏陰性及陽性菌。該藥于上世紀(jì)50年代發(fā)現(xiàn)并合成，于1999年由日本首先開發(fā)為治療痔瘡的口服藥物，由于其具有極強(qiáng)的脂溶性，易于被小腸吸收，藥物利用率較高，故其臨床療效較其它同類藥物有很大提高。國內(nèi)迄今尚未見到對TBS分離純化的研究報道。通常可以采用傳統(tǒng)低壓層析的方法制備得到TBS產(chǎn)品，但是工藝技術(shù)耗時長，生產(chǎn)量也受到限制，同時純度不高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對目前在制備三芐糖苷異構(gòu)單體的過程中所存在的時間長以及純度不高的問題，提供一種采用模擬移動床制備高純度三芐糖苷異構(gòu)單體的新方法，該方法包括以下步驟：

a.?三卞糖苷用甲醇溶解，濃度為0～100g/ml，一般將三芐糖苷配置成飽和溶液，具體實施時，可根據(jù)實際溶解效果進(jìn)行調(diào)整；

b.?用模擬移動床拆分三芐糖苷粗品；

c.?濃縮、重結(jié)晶得到高純度的兩種三芐糖苷異構(gòu)單體。

本發(fā)明的有益效果是可直接采用合成后的三芐糖苷粗品來制備三芐糖苷異構(gòu)單體，不需要大量的前處理過程，簡單、易控制，工藝技術(shù)簡化，適用于大規(guī)模制備。高效液相色譜測定中，總雜質(zhì)峰小于0.5%，單一雜質(zhì)峰不超過0.2%，完全可用于藥物的開發(fā)。

具體實施方式

1、設(shè)備及條件選擇

采用模擬移動床色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括洗脫泵、進(jìn)樣泵、萃取泵、色譜柱、電磁閥、單向閥、控溫器和PLC系統(tǒng)控制器及計算機(jī)組成。樣品溶液和洗脫液分別從樣品液入口和洗脫液入口注入系統(tǒng)，三卞糖苷的兩個異構(gòu)體分別從提余液和提取液兩個出口中流出，每隔一定的時間樣品液和洗脫液入口，提取液和提余液出口沿流動相流動的方向切換至下一支色譜柱。

2、色譜柱填料及流動相（溶劑）選擇

填料纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)涂覆型手性固定相，采用公知的方法（Okamoto?Y?,Kawashima?M?,?Hatada?K?J?.?Chromatogr?.1986,363:173~186）制備，填料粒度為1~150um，微粒越小，粒徑分布越窄，越有利于分離；但粒徑越小系統(tǒng)壓力越大，最適宜的粒徑范圍是20~40um。流動相（溶劑）為甲醇。

3、分離步驟

A、樣品由進(jìn)樣泵注入色譜系統(tǒng)，進(jìn)樣濃度的增加有利于提高產(chǎn)量，但其濃度受三卞糖苷溶解度的限制，色譜系統(tǒng)由4~24根制備柱組成，分為4個區(qū)，色譜柱數(shù)目越多分離越好，但系統(tǒng)的復(fù)雜度及系統(tǒng)壓力越高，最適合的是8~12根，通過模擬移動床色譜系統(tǒng)的控制器，定期控制電磁閥的開閉，使進(jìn)樣口、萃取液出口及殘余液出口沿流動相的方向定期變換，使三卞糖苷的兩個異構(gòu)體從提取液和提余液兩個出口流出系統(tǒng)；

B、得到的產(chǎn)品溶液，經(jīng)過濃縮、重結(jié)晶，得到純度在98%以上的合格產(chǎn)品；

C、成品檢驗

流動相：甲醇

流速：0.8ml/min

泵：江蘇漢邦科技分析泵

色譜柱：4.6*250mm??填料為自制涂敷型纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)

檢測器：江蘇漢邦科技紫外檢測器

檢測波長：254nm

下面結(jié)合實例進(jìn)一步說明本發(fā)明：

實施方式：

1、纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)填料的制備

按照文獻(xiàn)（Okamoto?Y?,Kawashima?M?,?Hatada?K?J?.?Chromatogr?.1986,363:173~186）的方法制備。纖維素與異氫酸苯酯在吡咯溶液中在100℃下反應(yīng)24小時，反應(yīng)得到的甲醇不容物即為纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)。纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)溶于四氫呋喃，并將氨丙基硅膠加入到溶液中，電磁攪拌，至四氫呋喃揮發(fā)完，重復(fù)3次，得到纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)涂敷型手性固定相。其中纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)與氨丙基硅膠的重量比為1:5；

2、流動相流速的選擇