[發明專利]一種高純度蘿卜硫素的提取純化方法無效

申請號：	201210414994.2	申請日：	2012-10-26
公開（公告）號：	CN102898341A	公開（公告）日：	2013-01-30
發明（設計）人：	何珺;謝述瓊;康冀川;楊佳年	申請（專利權）人：	貴州大學
主分類號：	C07C331/20	分類號：	C07C331/20
代理公司：	貴陽中工知識產權代理事務所 52106	代理人：	劉安寧
地址：	550025 貴***	國省代碼：	貴州;52
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種純度蘿卜提取純化方法
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及提取純化天然產物中有效成分的方法，具體而言，涉及從西蘭花種子中提取高純度蘿卜硫素的方法。

背景技術

據世界衛生組織統計，目前全球每年因癌癥死亡的人數高達700萬。但至今為止，人們尚未找到攻克癌癥的辦法。因此，研究和控制腫瘤是當今生命科學領域的重大課題。流行病學及藥理學研究表明：癌癥發病率低的地方，人們飲食中的蔬菜、水果所占比例較大。究其原因，是蔬菜水果中存在一種或多種阻止或減緩癌癥發展的活性成分，如番茄中的番茄紅素、大豆制品中的大豆異黃酮、漿果中的鞣化酸以及十字花科蔬果中的蘿卜硫素、吲哚類物質，均已證實具有良好的防癌抗癌作用。在眾多含有抗癌活性成分的蔬菜中，十字花科（洋白菜、花莖甘藍、球莖甘藍、青花椰菜、芥藍、白蘿卜和高麗菜等）富含硫代葡萄糖苷（硫甙），其在蔬菜本身具有的黑芥子酶作用下能降解成異硫代氰酸鹽類抗癌物質。蘿卜硫素是屬于異硫代氰酸鹽中的一種，也是迄今為止蔬菜中發現的最強抗癌成分。

西蘭花又名綠花菜、青花菜等，為十字花科蕓薹屬甘藍種中以綠色花球為產品的一個變種。研究表明，西蘭花中含有豐富的蘿卜硫素，能有效對抗乳腺癌和大腸癌。健康的人們經常食用西蘭花也能起到預防癌癥的作用。因此，西蘭花被譽為“防癌新秀”。

目前已有一些從西蘭花中提取蘿卜硫素的專利申請件，例如《一種提取蘿卜硫素的方法（CN101143842）》、《一種西蘭花種子提取物及其制備方法（CN101229211）》、《一種萊菔硫烷的制備方法（CN1982294）》、《一種蘿卜硫素的提取方法（CN101544995）》，均公開了西蘭花種子中有效活性成分蘿卜硫素的提取和純化方法。這些方法存在的問題有：純化過程中都采用硅膠柱層析,再用C₁₈制備色譜或凝膠柱來純化蘿卜硫素,?硅膠柱展開劑中使用有毒有機溶劑洗脫，生產過程還存在易燃易爆的問題，再加上柱層析材料再生較難等缺陷，導致上述專利只適合小批量及實驗室制備用，不適于工業化生產。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從西蘭花種子中提取高純蘿卜硫素的方法，以克服現有技術不能工業化生產的缺陷，從而為將從西蘭花種子中提取的蘿卜硫素用于人類防治癌癥打下基礎。

發明人經過系統的研究和試驗后，提出的方法包括以下步驟：

（1）用干燥的西蘭花種子為原料，粉碎后加水；在溫水中水解，得到固液混合物；

（2）往水解后的固液混合物中加入無水乙醇，超聲浸提，抽濾或雙層紗布過濾；

（3）將濾液在真空條件下濃縮蒸發乙醇；

（4）將去醇后料液用同極性大孔樹脂柱層析，用乙醇水溶液為洗脫劑進行梯度洗脫，選擇性收集含蘿卜硫素洗脫液；

（5）將獲得蘿卜硫素洗脫液，過氧化鋁干柱層析脫色,收集蘿卜硫素層析液，再經真空濃縮至油狀浸膏，即獲得純度為60％的蘿卜硫素；

（6）將上步獲得純度為60％的蘿卜硫素浸膏，加水溶解后,采用有機溶劑進行萃取；

（7）萃取后棄去水層,有機層進行真空濃縮,即得純度大于90％的蘿卜硫素提取物。

上述步驟(1)中，所述西蘭花種子粉碎至30～60目；所述加水的質量是種子粉末質量的1.5～2倍；所述溫水的溫度為25℃～35℃；所述水解時間為7～9h。

上述步驟(2)中，所述加入無水乙醇的質量是固液混合物質量的8～8.5倍；所述超聲浸提時間為30～60min，超聲浸提頻率40kHz，功率200W。