[發明專利]一種納米泡溶液及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210408702.4
• 申請日: 2012-10-23
• 公開（公告）號: CN102940895A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發明（設計）人: 周琦冰;麥麗誼;姚安娜
• 申請（專利權）人: 華中科技大學
• 主分類號: A61K49/22
• 分類號: A61K49/22;A61K49/00;A61K9/08
• 代理公司: 華中科技大學專利中心 42201
• 代理人: 夏惠忠

技術領域

本發明屬于醫藥及化學領域，涉及熒光-超聲影像對比劑，具體涉及一種雙功能熒光-超聲影像對比劑的制備方法和其醫學診斷之用途，特別涉及其作為影像對比劑在腫瘤診斷中的應用。

背景技術

超聲對比劑是一種在臨床腫瘤診斷中提高超聲影像診斷效果的靜脈注射劑。目前常用的超聲對比劑包括微泡超聲造影劑和納米泡超聲造影劑。近年研究表明，粒徑在500納米以下的納米級脂質體造影劑能通過腫瘤血管間隙達到靶部位，其造影增強效果優于微泡造影劑。同時，超聲對比劑在藥物共輸送的應用有著較大的前景。但是，已有的納米泡和微泡超聲造影劑成像時間都小于30分鐘，其在體內對腫瘤選擇的特異性不理想。同時磷脂質體的納米泡對腎臟和肝臟都有潛在毒性，并且存在安全性問題。腫瘤靶向的超聲造影劑主要是通過對泡的包膜表面進行腫瘤靶向分子的特異性修飾，從而可以與特定腫瘤組織受體緊密結合，實現超聲的組織特異性成像。但是，由于腫瘤血管在不同生長階段表現不同結構特性，需要對包膜表面進行多種配體修飾以達到有效的增強效果，因此實際臨床應用不高。

近年來，熒光成像方法因其在外科手術中的術中熒光應用而迅猛發展。在術中熒光應用中，腫瘤特異性的熒光探針成像可以準確顯示腫瘤位置和大小，從而為切除潛在腫瘤組織提供了有效的方案并提高了患者的生存率。除此之外，熒光成像在動物模型中研究藥物動力學如分布，吸收和代謝等提供了新的方法學手段。因此，新型雙功能熒光-超聲納米泡作為影劑影像對比劑如能實現腫瘤特異性成像，其作為腫瘤診斷，藥物共輸送和動力學研究，以及術中熒光的影像對比劑有著極大的意義和前景。

發明內容

本發明的任務是提供一種納米泡溶液，提供一種新的雙功能熒光-超聲納米泡，使其作為影像對比劑在體內具有腫瘤選擇性的造影成像功能，并提供該納米泡的制備方法。

實現本發明的技術方案是：

本發明提供的納米泡溶液，由以下百分重量比的組分組成：

中櫚酸抗壞血酸酯：0.10-0.50％

1，2-十六烷二醇：0.002-0.02％

吐溫60：0.03-0.15％

羥乙基淀粉及其類似葡聚糖：1.0-3.0％

殼聚糖：0.0005-0.0015％

熒光染料：0.0001-0.0004％

五聚乙二醇N-羥基琥珀酰亞胺酯：0.0001-0.0006％

磷酸鹽緩沖溶液96-99％，

在所述的納米泡中含由全氟丙烷氣體。

各組分優選的百分重量比為：

中櫚酸抗壞血酸酯：0.37％

1，2-十六烷二醇：0.01％

吐溫60：0.1％

羥乙基淀粉及其類似葡聚糖：2％

殼聚糖：0.00125％

熒光染料：0.00024％

五聚乙二醇N-羥基琥珀酰亞胺酯：0.0003％

磷酸鹽緩沖溶液97％。

所述的熒光染料可以是青色素(Cyanine)、得克薩斯紅(Texas?red)或阿歷克斯熒光團系列(Alexa?Fluor)。

本發明提供的納米泡溶液的制備方法，包括以下步驟：

步驟一、配制混懸液：

稱取羥乙基淀粉、中櫚酸抗壞血酸酯、1，2-十六烷二醇，羥乙基淀粉與中櫚酸抗壞血酸酯和1，2-十六烷二醇的重量比為：200∶37∶1，加入到磷酸鹽緩沖溶液中，磷酸鹽緩沖溶液與羥乙基淀粉、櫚酸抗壞血酸酯和1，2-十六烷二醇的重量比為48∶1；再加入吐溫60，吐溫60與羥乙基淀粉的重量比為1∶20，加氫氧化鈉溶液調節PH為7，制成混懸液；

步驟二、超聲處理：

將制成的混懸液放置于冰浴中使其溫度降至10攝氏度，向體系通入經過2μm濾膜過濾的全氟丙烷氣體10分鐘即開始超聲，超聲中保持持續通全氟丙烷氣體至超聲結束，超聲條件：使超聲變幅桿置于反應液液面2毫米深以保證反應物和氣體充分混合，于540瓦超聲功率下超聲80個周期，其中每一周期的超聲工作時間為5秒、間歇時間為10秒，整個超聲過程使溶液溫度維持在15攝氏度以下，超聲80個周期完成后，加入低分子量殼聚糖溶液，殼聚糖溶液與吐溫60的重量比為1∶80；再進行第二次超聲，超聲條件為：36瓦超聲40周期，其中每一周期的超聲時間為5秒、間歇時間為10秒，得到乳白色溶液；所述的低分子量殼聚糖溶液的配置方法是：取0.5克低分子量殼聚糖和0.5克乙酸，加入99克水配置而成；

步驟三、離心：