[發明專利]梔子藍的制備方法

有效

• 申請號: 201210404931.9
• 申請日: 2012-10-22
• 公開（公告）號: CN103773823A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 蕭偉;王振中;丁崗;畢宇安;鈕小松;孟兆青;程寧波
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: C12P17/16
• 分類號: C12P17/16
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

1.一種梔子藍的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟：

a）酶解梔子苷：以水為溶劑，加入梔子苷、復合纖維素酶、無水乙酸鈉和冰醋酸，15～70℃條件下攪拌反應12～36小時；其中，復合纖維素酶與梔子苷質量比0.5～1.5：0.5～1.5，無水乙酸鈉與梔子苷質量比0.3～0.5：0.6～1.2，冰醋酸與梔子苷質量比0.1～0.4：0.8～1.2；將酶解后得到的溶液離心，棄去沉淀，收集上清液；

b）顯色：將上清液按照梔子苷與甘氨酸摩爾比為0.5～1.5：0.5～1.5的比例加甘氨酸顯色；將顯色后得到的溶液離心，棄去沉淀，收集上層溶液，得到提取液；

c）富集純化：采用大孔吸附樹脂柱或氫鍵吸附樹脂柱富集純化，水洗2～6倍柱體積后，用濃度為50%～70%乙醇洗2～6倍柱體積，分別收集水洗脫液和乙醇洗脫液；水洗脫液濃縮、噴霧干燥得到色價在20～40的梔子藍，乙醇洗脫液濃縮、噴霧干燥得到色價在60以上的梔子藍。

2.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于該方法所述的酶解梔子苷步驟中采用的酶為160～200萬活力單位的復合纖維素酶。

3.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于該方法所述的水用量為每1kg梔子苷用水20～30L；所述的離心條件為10000～18000r·min^-1條件下離心15～25min。

4.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于顯色步驟所述的顯色條件為在20～100℃下顯色1～3小時。

5.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于富集純化步驟采用的大孔吸附樹脂為極性或非極性大孔吸附樹脂。

6.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于富集純化步驟采用的大孔吸附樹脂為HPD600型大孔吸附樹脂，所述的氫鍵吸附樹脂為HPD417型吸附樹脂。

7.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于富集純化步驟中采用的洗脫速度是1～3BV/h，上樣量為每1.5ml柱體積加入0.5～1ml提取液。

8.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于富集純化步驟中濃縮采用的溫度為15～70℃。

9.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于該方法所述的濃縮后的水洗脫液噴霧干燥采用的條件為：進口溫度170～180℃，出口溫度為85～90℃。

10.根據權利要求1所述的梔子藍的制備方法，其特征在于該方法所述的濃縮后的乙醇洗脫液噴霧干燥采用的條件為：進口溫度170～180℃，出口溫度為75～80℃。