[發明專利]具有抗腫瘤活性的四氫吡啶并吡喃-單克隆抗體CD14結合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210401778.4
• 申請日: 2012-10-19
• 公開（公告）號: CN102898522A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: 孫傳文;肖笛;李靜;薛思佳;李興玉
• 申請（專利權）人: 上海師范大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;A61K31/436;A61K47/48;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227
• 代理人: 張美娟

技術領域

本發明涉及具有抗腫瘤活性的四氫吡啶并吡喃-單克隆抗體CD14結合物及其制備方法和應用；具體為一類能高效抑制人白血病K562細胞系、卵巢癌MDR-MB-231細胞系及肝癌SMMC-7721細胞系增殖的四氫吡啶并吡喃與單克隆抗體CD14的結合物（代號為：CD14-TPP）的制備，及作為治療白血病、卵巢癌和肝癌等單抗藥物的先導化合物。屬于化學生物藥物領域。?

背景技術

白血病、卵巢癌及肝癌是發病率很高的三大常見惡性腫瘤,然而現有技術沒有理想的高效治療上述癌癥的藥物。?

白血病是一類造血干細胞克隆性疾病。好發于青少年，其發病率排在青少年腫瘤的第一位，所以對人類的危害更為明顯和突出。慢性白血病中的K562細胞系，因其自身凋亡的抵抗力強于其他細胞系，為此，抑制K562細胞的增殖成為治療白血病非常重要的手段。?

卵巢癌是女性最常見的腫瘤之一，雖然其發病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而列居第三位，然而因卵巢癌致死者卻占各類婦科腫瘤的首位，對婦女生命造成嚴重威脅。。?

肝癌是死亡率僅次于胃癌和食道癌的第三大常見惡性腫瘤。肝癌中的SMMC-7721細胞系，其抵抗凋亡的能力比其他肝癌細胞系強，為此，抑制SMMC-7721細胞系的增殖成為治療肝癌的重要手段。?

然而，現在臨床上常用的化療藥物的共同的缺點是選擇性不強，對正常細胞和腫瘤細胞幾乎具有相同的殺傷作用，因此，毒性較大,對骨髓、消化道細胞和生殖細胞也有很強的殺傷作用。?

據公開號為CN102285993A的專利報道，四氫吡啶并吡喃衍生物（Ⅰ）（簡寫為TPP）具有高效抑制人白血病K562細胞、卵巢癌MDR-MB-231細胞及肝癌SMMC-7721細胞的增殖的生物活性，其抑制上述三種癌細胞增殖的IC₅₀均值低于抗癌藥5-氟尿嘧啶，具有潛在的實用性。然而，四氫吡啶并吡喃衍生物TPP的選擇性不高，對正常細胞有一定的毒性，在一定程度上限制了它們在抗癌藥物上的應用。?

為了解決上述問題,近年來已有將抗癌藥與單克隆抗體(簡稱單抗)結合，制成單克隆抗體藥物（簡稱單抗藥物）的相關報道,單抗藥物能對腫瘤相關靶點顯示特異性結合,對腫瘤細胞有選擇性殺傷作用，并在動物實驗中有顯著的療效。為此，研制單抗藥物有巨大的潛力,單抗藥物將在腫瘤治療中發揮重要作用。?

由于編碼為CD14的單克隆抗體（簡稱單抗CD14）對人白血病K562、卵巢癌MDR-MB-231及肝癌SMMC-7721等細胞系具有高度特異性,將其與具有高效抑制人白血病K562細胞系、卵巢癌MDR-MB-231細胞系及肝癌SMMC-7721細胞系增殖活性的四氫吡啶并吡喃衍生物（代號為TPP）（Ⅰ）結合，制成TPP與單抗CD14結合的單抗藥物先導化合物（代號為CD14-TPP）（Ⅱ），使CD14-TPP能靶向于特定的腫瘤細胞，大大降低其對正常組織細胞的毒性。為此，單抗藥物先導化合物CD14-TPP（Ⅱ）有望成為極具臨床應用潛力的抗癌新藥。?

發明內容

本發明目的是為了提供一類具有抗腫瘤活性的四氫吡啶并吡喃-單克隆抗體CD14結合物（簡寫為CD14-TPP），該CD14-TPP結合物是一類可作為治療白血病、卵巢癌和肝癌藥物的單抗藥物的先導化合物。?

本發明的第二個目的是為了提供該單抗藥物的先導化合物CD14-TPP的制備方法。?

本發明的第三個目的是將該單抗藥物的先導化合物CD14-TPP用于制備治療白血病、卵巢癌和肝癌的抗腫瘤藥物。CD14-TPP能高效抑制人白血病K562細胞、卵巢癌MDR-MB-231細胞及肝癌SMMC-7721細胞的增殖，其抑制上述三種癌細胞增殖的IC₅₀均值低于抗癌藥5-氟尿嘧啶。該CD14-TPP體內急性毒性低，對小鼠正常骨髓細胞的毒性較低，具有潛在的實用性。?

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的。?

本發明提供的單抗藥物的先導化合物CD14-TPP，具有高效抑制人白血病K562細胞系、卵巢癌MDR-MB-231細胞系及肝癌SMMC-7721細胞系增殖的活性，且對小鼠正常骨髓細胞的毒性較低，該抗白血病、卵巢癌和肝癌的單抗藥物的先導化合物CD14-TPP的結構式如式（Ⅱ）所示：?

在式（Ⅱ）中：?

R₁為：氟、氯、溴、氰基、硝基、羧基、酯基、羰基、磺酸基、烴基和烴氧基中的一種；?