[發明專利]一種促神經修復材料及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201210397806.X
• 申請日: 2012-10-18
• 公開（公告）號: CN102861360A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 解慧琪;劉宏銀;羅靜聰;楊志明
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: A61L27/38
• 分類號: A61L27/38;A61L27/36;A61L27/54;A61K35/30;A61K38/18;A61K47/46;A61P3/02
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

1.一種促神經修復材料，其特征在于：它包括小腸黏膜下層和神經生長因子，所述神經生長因子的含量為1~500pg/cm²。

2.根據權利要求1所述的材料，其特征在于：它是由如下方法制備：

（1）取小腸黏膜下層和雪旺細胞，將雪旺細胞接種于小腸黏膜下層上，共培養，得復合了雪旺細胞的小腸黏膜下層；

（2）將復合了雪旺細胞的小腸黏膜下層反復凍融，凍干，即得所述的材料。

3.根據權利要求2所述的材料，其特征在于：所述步驟（1）中雪旺細胞的接種密度5×10³個/cm²~2.5×10⁵個/cm²；共培養的時間是3~15天。

4.根據權利要求3所述的材料，其特征在于：所述雪旺細胞為采用雙酶分步消化法處理大鼠雙側坐骨神經得到的原代細胞或者RSC96大鼠雪旺細胞，接種密度為2.5×10⁵個/cm²或者5×10³個/cm²。

5.根據權利要求4所述的材料，其特征在于：所述雙酶分步消化法使用的酶是胰蛋白酶和II型膠原酶。

6.根據權利要求2所述的材料，其特征在于：所述步驟（2）中反復凍融是將復合了雪旺細胞的小腸黏膜下層置于液氮中10分鐘，37℃處理10分鐘，重復操作3次。

7.根據權利要求2所述的材料，其特征在于：所述步驟（2）中反復凍融是將復合了雪旺細胞的小腸黏膜下層置于液氮中8~12分鐘，室溫放置15~25分鐘，置于搖床上用0.2~0.5%SDS溶液洗滌3~7分鐘，去離子水漂洗，重復操作3~5次；再用0.2~0.5%SDS溶液置于搖床上振蕩洗滌15~25分鐘，去離子水漂洗5~10分鐘。

8.一種制備權利要求1~7任意一項所述促神經修復材料的方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）取小腸黏膜下層和雪旺細胞，將雪旺細胞接種于小腸黏膜下層上，共培養，得復合了雪旺細胞的小腸黏膜下層；

（2）將復合了雪旺細胞的小腸黏膜下層反復凍融，凍干，即得所述的材料。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述步驟（1）中雪旺細胞的接種密度5×10³個/cm²~2.5×10⁵個/cm²；共培養的時間是3~15天。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：所述雪旺細胞為采用雙酶分步消化法處理大鼠雙側坐骨神經得到的原代細胞或者RSC96大鼠雪旺細胞，接種密度為2.5×10⁵個/cm²或者5×10³個/cm²。

11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于：所述雙酶分步消化法使用的酶是胰蛋白酶和II型膠原酶。

12.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述步驟（2）中反復凍融是將復合了原代雪旺細胞的小腸黏膜下層置于液氮中10分鐘，37℃處理10分鐘，重復操作3次。

13.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述步驟（2）中反復凍融是將復合了雪旺細胞的小腸黏膜下層置于液氮中8~12分鐘，室溫放置15~25分鐘，置于搖床上用0.2~0.5%SDS溶液洗3~7分鐘，去離子水漂洗，重復操作3~5次；再用0.2~0.5%SDS溶液置于搖床上振蕩洗15~25分鐘，去離子水漂洗5~10分鐘。

14.權利要求1~7任意一項所述促神經修復材料在制備治療組織缺損的藥物中的用途。