[發(fā)明專利]含芳基硼酸香豆素類化合物及其在糖檢測(cè)中的應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210396468.8
• 申請(qǐng)日: 2012-10-17
• 公開（公告）號(hào): CN102887914A
• 公開（公告）日: 2013-01-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 錢俊紅;張凌怡;柏紅艷;張維冰;田海玉;孫倩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華東理工大學(xué)
• 主分類號(hào): C07F5/02
• 分類號(hào): C07F5/02;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及糖檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，是一種含芳基硼酸香豆素類化合物及其在糖檢測(cè)中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】

哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面的糖主要以糖蛋白和糖脂的形式存在。這些糖基化的生物分子與許多生理和病理過(guò)程密切相關(guān)，如細(xì)胞間的信息交流、胚胎早期發(fā)育、細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)以及某些癌癥轉(zhuǎn)移等。通過(guò)在細(xì)胞上標(biāo)記對(duì)糖類化合物有特異性響應(yīng)的探針?lè)肿涌梢詭椭芯可鲜錾砘虿±磉^(guò)程。硼酸因可與單糖分子中的二醇發(fā)生特異性共價(jià)鍵合常被用作糖識(shí)別單元。利用硼酸共價(jià)鍵合不同的發(fā)色團(tuán)對(duì)糖進(jìn)行特異性識(shí)別的熒光探針已諸見報(bào)道，但已有探針的發(fā)射波長(zhǎng)大多較短，限制了它們?cè)谏镌嚇又械膽?yīng)用，因此發(fā)展具有長(zhǎng)發(fā)射波長(zhǎng)、高靈敏的糖探針具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

香豆素因其熒光量子產(chǎn)率高、穩(wěn)定性好、Stokes位移較大，是熒光探針?lè)肿釉O(shè)計(jì)時(shí)常用的發(fā)色團(tuán)。如果擴(kuò)大該熒光團(tuán)的共軛體系、增加分子的電子推-拉作用，可以使得最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)紅移，基于此本發(fā)明設(shè)計(jì)了新型的香豆素類熒光分子探針，通過(guò)將α，β-不飽和酮共軛連接在香豆素分子上以延長(zhǎng)共軛體系，分子上吸電子的乙烯基酮基和給電子的N，N-二乙基氨基組成的電子推拉體系也有利于發(fā)射和激發(fā)波長(zhǎng)的紅移。將苯硼酸通過(guò)共價(jià)鍵連接至發(fā)色團(tuán)上作為糖分子受體，與糖結(jié)合后探針?lè)肿拥碾娮雍湍芰繝顟B(tài)的改變將導(dǎo)致其光譜性質(zhì)的變化，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)糖類化合物的檢測(cè)。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種含芳基硼酸香豆素類化合物及其在糖檢測(cè)中的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：

一種含芳基硼酸香豆素類化合物，其結(jié)構(gòu)通式：

式中：R為N，N-二烷基氨基、羥基或者烷氧基。

一種含芳基硼酸香豆素類化合物的合成方法，其具體步驟為：

(1)4-溴苯乙酮，雙(頻哪醇合)二硼，醋酸鉀以及1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀和溶劑加入到反應(yīng)器中，其中，4-溴苯乙酮與雙(頻哪醇合)二硼的摩爾比為1.0∶1.0～1.8；4-溴苯乙酮與醋酸鉀的摩爾比為1.0∶2.0～3.0；[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀與4-溴苯乙酮的摩爾量之比為1～3∶100；4-溴苯乙酮，雙(頻哪醇合)二硼，醋酸鉀以及1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀的混合物與溶劑的固液比為1∶3～5(g/mL)；加熱回流，TLC點(diǎn)板跟蹤反應(yīng)至原料消失；除去溶劑，硅膠柱提純，得淡黃色粘稠狀產(chǎn)物1，產(chǎn)率92.5％；

所述的溶劑為二氧六環(huán)；

(2)4-R基取代水楊醛，丙二酸二乙酯和溶劑加入到反應(yīng)器中，其中4-R基取代水楊醛與丙二酸二乙酯的摩爾比為1∶2～3；4-R基取代水楊醛與溶劑的固液比為1∶5～7(g/mL)，加熱回流13h；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑后向燒瓶中加入1∶1的濃鹽酸和冰醋酸的混合酸，4-R基取代水楊醛與混合酸的固液比為1∶6～8(g/mL)，繼續(xù)攪拌回流7h；將反應(yīng)液冷卻至室溫后倒入去離子水中，用NaOH溶液調(diào)節(jié)溶液的pH至5左右，析出沉淀，抽濾，得茶綠色固體；粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱分離，得米黃色固體2，產(chǎn)率81.4％；所述的溶劑為乙醇與二氧六環(huán)，體積比為30∶1；R基為N，N-二烷基氨基、羥基或者烷氧基；

(3)在N₂保護(hù)下，向裝有POCl₃的反應(yīng)器中滴加DMF，將由步驟2所得的米黃色固體2的DMF溶液緩慢滴加到上述試樣中，溶液顏色逐漸由橙黃色變?yōu)樯罴t色；加熱攪拌，在60～70℃反應(yīng)15～25h；將反應(yīng)液倒入冰水中，用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至5左右，抽濾，得紅褐色固體，干燥；粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱分離，旋蒸去溶劑，得橙紅色結(jié)晶物3，產(chǎn)率61.0％；

(4)將由步驟3得到的橙紅色結(jié)晶物3，步驟1得到的淡黃色粘稠狀產(chǎn)物1以及溶劑加入到反應(yīng)器中，然后向反應(yīng)液中滴加幾滴吡咯烷，其中橙紅色結(jié)晶物3與淡黃色粘稠狀產(chǎn)物1的摩爾比為1∶1.5～2.5，橙紅色結(jié)晶物3和淡黃色粘稠狀產(chǎn)物1的混合物與二氯甲烷與無(wú)水乙醇混合溶劑的固液比為1∶10～20(g/mL)，室溫反應(yīng)4天；旋干溶劑后產(chǎn)物用石油醚/乙酸乙酯的固液比為1∶100～200(g/mL)的混合溶液洗滌，抽濾，得鮮紅色固體4，產(chǎn)率22.0％；

所述溶劑為二氯甲烷與無(wú)水乙醇的混合液，體積比1∶1；