[發(fā)明專利]煙草及煙草制品中20種農(nóng)藥殘留的GC-MS/MS測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210394617.7
• 申請日: 2012-10-17
• 公開（公告）號: CN102866215A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡清源;陳曉水;唐綱嶺;侯宏衛(wèi);邊照陽;楊飛;張洪非
• 申請（專利權(quán)）人: 國家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于煙草及煙草制品中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)領(lǐng)域，主要涉及煙草及煙草制品中的敵菌丹、內(nèi)吸磷-O、殺蟲脒、內(nèi)吸磷-S、八甲磷、自克威、棉隆、異丙甲草胺、除草定、敵草胺、烯效唑、乙酯殺螨醇、腈菌唑、稻瘟靈、草枯醚、丁硫克百威、溴苯磷、三氯殺螨砜、丙硫克百威、精喹禾靈等20種農(nóng)藥殘留的測定技術(shù)。?

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背景技術(shù)

農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥施用于農(nóng)作物之后，殘留在環(huán)境、農(nóng)作物和生物體內(nèi)的微量農(nóng)藥及其代謝物和降解產(chǎn)物等。在煙草的育苗生長和采摘后的儲存過程中，不可避免的使用到除草劑、植物生長調(diào)節(jié)劑、殺蟲劑、殺螨劑和殺菌劑等。而同時(shí)煙草作為一種吸食品，其安全性要求高，因此，煙草中的農(nóng)藥殘留得到了廣泛的關(guān)注。?

農(nóng)藥主要通過呼吸、飲食等方式進(jìn)入人體，在人體組織和器官內(nèi)進(jìn)行積累，尤其是脂肪和肝臟中。對人體健康的影響主要有：急性中毒、慢性中毒、影響神經(jīng)系統(tǒng)和致癌、致畸、致突變等。?

對食品中農(nóng)藥殘留的控制要求分析方法快速、精確、有效、靈敏度高、選擇性好。顯然，多種農(nóng)藥殘留分析的方法（Multi?Residue?Methods）可對不同種類、不同極性和不同化學(xué)性質(zhì)的多種農(nóng)藥一次進(jìn)樣完全分析，縮短分析時(shí)間，提高檢測效率。在多種農(nóng)藥殘留分析中，使用最多的方法即色質(zhì)聯(lián)用，包括用GC或LC進(jìn)行分離，用MS進(jìn)行定性定量檢測。?

對煙草中多種農(nóng)藥殘留分析的檢測方法主要有氣相色譜（GC）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）和氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS/MS）等。石杰等利用微波輔助萃取，GC-ECD檢測的方法對17種有機(jī)氯農(nóng)藥進(jìn)行同時(shí)測定，靈敏度高，檢出限低，但方法容易出現(xiàn)假陽性誤判。質(zhì)譜作為檢測器提高了方法在定性上的可靠性，二級質(zhì)譜（MS/MS）相對一級質(zhì)譜（MS），其抗干擾能力更強(qiáng)，對樣品前處理的要求更低。?

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發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的旨在克服上述現(xiàn)有技術(shù)缺陷，而專門提供的一種煙草及煙草制品中20種農(nóng)藥殘留的GC-MS/MS測定方法，即敵菌丹、內(nèi)吸磷-O、殺蟲脒、內(nèi)吸磷-S、八甲磷、自克威、棉隆、異丙甲草胺、除草定、敵草胺、烯效唑、乙酯殺螨醇、腈菌唑、稻瘟靈、草枯醚、丁硫克百威、溴苯磷、三氯殺螨砜、丙硫克百威、精喹禾靈等20種農(nóng)藥殘留的測定。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：?

一種煙草及煙草制品中20種農(nóng)藥殘留的GC-MS/MS測定方法，將待測樣品經(jīng)水浸潤后，加入乙腈和內(nèi)標(biāo)物，然后渦旋提取、鹽析分層，再加入甲苯進(jìn)行液液萃取，取上清液經(jīng)分散固相萃取（d-SPE）后,以氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）進(jìn)行測定的方法,具體步驟如下：

a、內(nèi)標(biāo)溶液的配制：配制TPP（三苯基磷酸酯）濃度為20?μg/mL的丙酮溶液；

b、稱取樣品：稱取2.0?g煙草樣品于50?mL具塞離心管中，精確到0.1?g；?

c、加水浸潤樣品：準(zhǔn)確加入10?mL水，浸潤10?min；

d、振蕩萃取：準(zhǔn)確加入10?mL乙腈和50?μL內(nèi)標(biāo)溶液，在漩渦混合振蕩儀上以2000?rpm渦旋1?min；放入4?℃冰箱冷凍10?min；

e、鹽析分層：加入鹽析試劑包，立即于漩渦混合振蕩儀上以2000?rpm振蕩1?min；

f、液液萃取：加入5?mL甲苯，在漩渦混合振蕩器上以2000?rpm的轉(zhuǎn)速振蕩2?min，靜置；

g、取上清液1.5?mL于2?mL離心管中，加入150?mg無水硫酸鎂和40?mg?PSA（N-丙基乙二胺吸附劑），在漩渦混合震蕩儀上以2000?rpm振蕩2?min，在高速離心機(jī)上以9000?rpm離心3?min，取上清液待用；

h、準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別稱取0.010?g（精確至0.1?mg）各種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，置于同一10?mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，然后用甲苯稀釋并最終配制成具有濃度梯度的各種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；?

i、準(zhǔn)備基質(zhì)配標(biāo)工作溶液：對空白煙草樣品（指不含以上20種農(nóng)藥的煙草樣品）按相同的前處理方式（b-g過程）處理后（起到減弱基質(zhì)效應(yīng)的作用），分別取1?mL上清液氮?dú)獯蹈珊螅??mL不同濃度梯度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行復(fù)溶；

j、GC-MS/MS測定:吸取配制好的不同濃度的基質(zhì)配標(biāo)工作溶液，過0.22?μm有機(jī)濾膜后，注入GC-MS/MS;