[發明專利]多巴反應性肌張力障礙相關基因突變、其檢測方法及其用途

有效

• 申請號: 201210392321.1
• 申請日: 2012-10-16
• 公開（公告）號: CN103725687A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 郭紀鋒;唐北沙;嚴新翔;張峪涵;肖晶晶;劉軒竹;王俊;汪建;楊煥明
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅醫院;深圳華大基因科技有限公司
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/11;C12Q1/68;C07K14/47
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

技術領域

本發明屬于分子病理學領域，特別涉及多巴反應性肌張力障礙相關基因突變。

背景技術

在1976年，多巴反應性肌張力障礙（dopa?responsive?dystonia，DRD）首次被Segawa等報道，被稱為伴有明顯晝間波動的遺傳性進行性肌張力障礙（hereditary?progressive?dystonia?with?marked?diurnalfluctuation，HPD）或Segawa病（Segawa?M，Hosaka?A，Miyagawa?F，et?al.Hereditary?progressive?dystonia?with?marked?diumalfluctuation．Adv?Neuro，1976，14：215-233.）。DRD是一種少見的遺傳性運動障礙疾病，常發于兒童或青少年，以肌張力障礙或步態異常為首發癥狀，發病率約為每百萬人0.5－1例（Segawa?M,Nomura?Y,Nishiyama?N.Autosomal?dominant?guanosine?triphosphatecyclohydrolase?I?deficiency(Segawa?disease).Ann?Neurol?2003:54(Suppl6):S32–45.）。

大多數DRD呈常染色體顯性遺傳（autosomal?dominan，AD），致病基因為三磷酸鳥苷環化水解酶I基因（guanosine?triphosphatecyclohydrolase?I，GCH1）；少數呈常染色體隱性遺傳（autosomalrecessive，AR），致病基因為酪氨酸羥化酶（tyrosine?hydroxylabe，TH）基因；個別可呈散發性。

隨著分子遺傳學研究的發展，已發現70多種位于GCH1基因編碼區或內含子外顯子結合區的不同突變；其中約52%為錯義突變,17%為無義突變，11%為剪切點突變，20%為缺失或插入突變。目前，在AR-DRD家系中已報道的8種TH基因突變（3種純合子突變，5種復合雜合子突變），主要位于外顯子內，僅有1種突變位于內含子內。外顯子內的突變中，除第14外顯子的1493A→G突變導致TH四聚體區的氨基酸改變外，其余突變均導致TH催化區內不同位點的氨基酸改變,對TH的結構與功能產生不同程度的影響，第11內含子的分支點序列內24T→A突變可引起其他分支點序列的啟動，導致TH的Pre-mRNA剪接錯誤，產生錯誤的mRNA，從而導致了整個遺傳信息的改變。

多巴反應性肌張力障礙（DRD）常染色體隱性遺傳家系TH基因的新突變發現，有利于完善DRD患者的分子診斷，也可為研究DRD的發病機理提供重要線索。

因此，本領域仍然需要發現DRD相關的TH基因突變，以及檢測DRD相關疾病的方法。

發明內容

本發明人經過不懈的努力，發現了多巴反應性肌張力障礙（DRD）常染色體隱性遺傳家系TH基因的新突變，并由此提供了下述發明：

本發明涉及多巴反應性肌張力障礙（DRD）常染色體隱性遺傳家系TH基因新的復合雜合錯義突變，具體為：c.1004C>T（p.A335V）和c.1451G>A（p.R484H）。

在第一方面，本發明涉及DRD的生物標記物，即突變的TH基因或TH蛋白，所述生物標記物是具有選自如下的突變的TH基因或TH蛋白：

錯義突變（c.1004C>T,p.A335V）；

錯義突變（c.1451G>A,p.R484H）。

在一個實施方案中，本發明的突變TH基因為具有以下突變的SEQID?NO:1：

錯義突變c.1004C>T；和/或

錯義突變c.1451G>A。

在一個實施方案中，本發明的突變的TH蛋白為具有以下突變的SEQID?NO:2：

錯義突變p.A335V；和/或

錯義突變p.R484H。

在第二方面，本發明涉及一種檢測DRD的方法，所述方法包括檢測受試者的TH基因或TH蛋白中是否存在突變位點，如果有突變位點，則所述受試者被鑒定為患有DRD或易患DRD，或者其后代會患有DRD或易患DRD，所述突變位點選自如下任一種或其組合：

錯義突變（c.1004C>T，p.A335V）；和

錯義突變（c.1451G>A,p.R484H）。

在一個實施方案中，TH蛋白為SEQ?ID?NO:2的序列表示。