[發(fā)明專利]復(fù)方蓯蓉益智膠囊的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210390779.3
• 申請日: 2012-10-15
• 公開（公告）號: CN102914615A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧海濤;趙玉龍
• 申請（專利權(quán)）人: 遼源譽(yù)隆亞東藥業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/02
• 代理公司: 北京鴻元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11327
• 代理人: 陳英俊

1.一種復(fù)方蓯蓉益智膠囊的檢測方法，其特征在于，該方法由下列步驟組成：

A)內(nèi)容物性狀觀察；

B)薄層色譜法鑒別方中何首烏、荷葉、肉蓯蓉、地龍和漏蘆；

C)根據(jù)中國藥典2010年版一部附錄IL，檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；和

D)高效液相色譜法測定方中何首烏活性成分的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方蓯蓉益智膠囊的檢測方法，其特征在于，

所述步驟B)的步驟如下：

(1)取復(fù)方蓯蓉益智膠囊內(nèi)容物2g，加丙酮15ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作供試品溶液；另取何首烏對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；再取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15μl、對照品藥材溶液3μl、對照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠Ｇ薄層板上，以體積比15∶5∶1比例的石油醚－甲酸乙酯－甲酸上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；

(2)取復(fù)方蓯蓉益智膠囊內(nèi)容物4g，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?%鹽酸溶液10ml使溶解，濾過，濾液加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10，用三氯甲烷振搖提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)蒙倭咳燃淄槭谷芙?，通過中性氧化鋁柱，用三氯甲烷洗脫，收集洗脫液5ml，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?.2ml使溶解，作為供試品溶液；另取荷葉對照藥材2g，加60%乙醇40ml，回流20分鐘，濾過，濾液同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比6∶2∶0.1比例的三氯甲烷－丙酮－濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)；

(3)取復(fù)方蓯蓉益智膠囊內(nèi)容物1g，加甲醇10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取肉蓯蓉對照藥材2g，加甲醇5ml，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以體積比2∶1∶7比例的甲醇－冰醋酸－水為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；

(4)取復(fù)方蓯蓉益智膠囊內(nèi)容物1g，加20%乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液通過顆粒狀活性碳柱，收集洗脫液，作為供試品溶液；另取地龍對照藥材0.5g，置乳缽中，加水研磨2次，每次5ml，離心，合并上清液，加無水乙醇15ml，搖勻，靜置30分鐘，離心，棄去上清液，收集沉淀物，用60%乙醇2ml洗滌一次，沉淀物加20%乙醇2.5ml使溶解，取上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比7∶2∶1比例的正丁醇一冰醋酸一水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105℃加熱5～10分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；

(5)取復(fù)方蓯蓉益智膠囊內(nèi)容物1g，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取漏蘆對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比4∶1的環(huán)己烷－丁酮為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈（365nm）下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的復(fù)方蓯蓉益智膠囊的檢測方法，其特征在于，

所述步驟D)的步驟如下：

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以10∶20∶110∶0.01體積比的甲醇－乙腈－水－磷酸為流動相；檢測波長為320nm；理論板數(shù)按2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500；

對照品溶液的制備取五氧化二磷減壓干燥至恒重的2,3,5,4＇-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對照品1.0mg，精密稱定，置50ml棕色量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得，每1ml中含2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷0.02mg，避光保存；

供試品溶液的制備取復(fù)方蓯蓉益智膠囊裝量差異項(xiàng)下內(nèi)容物，研成細(xì)粉，混勻，取細(xì)粉約0.15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，稱定重量，超聲處理20分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，上清液用微孔濾膜濾過，即得，避光保存；

測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；

所述復(fù)方蓯蓉益智膠囊每粒含制何首烏以2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷計(jì)，不得少于0.70mg。