1.一種海水中16種脂溶性貝類毒素的液質聯用檢測方法,包括吸附袋的制作、吸附袋的使用、毒素萃取、測定條件與方式、定性測定和定量測定,其特征在于具體步驟如下:
(1)吸附袋的制作:用聚酯網布,縫制成布袋,裝入樹脂之后密封,在正方形布袋的一角固定尼龍掛扣,把吸附袋在甲醇中浸泡,然后用蒸餾水浸泡去除甲醇,隨即放入密封的塑料袋中,在4℃條件下短時間保存,待用;
(2)吸附袋的使用:把吸附袋系在長繩上,分上、中、下三層,層間隔至少超過5米以上,否則相應減少層數,每層一次固定3個及以上吸附袋,將繩系于固定位置的漂浮桿上,每間隔7-10天將吸附袋取出,再放入新的吸附袋,提取的吸附袋用蒸餾水沖洗,放入預先編號的塑料袋中,在4℃條件下短時間保存;
(3)毒素萃取:將樹脂填料轉入沙芯濾柱中,用50-70mL去離子水洗去鹽分,把柱中水份正壓吹干,加入20mL甲醇,濾入蒸發瓶中,再加入20mL甲醇重復提取一次,提取液在40℃使甲醇揮發,殘余1-2mL水,用5mL二氯甲烷萃取后離心,取出二氯甲烷層,再5mL二氯甲烷重復萃取一次,合并兩次二氯甲烷萃取層后用氮吹干,用1.0mL?80%的甲醇定容,以0.22μm的濾膜過濾,進樣高效液相色譜-串聯質譜分析;
(4)測定條件與方式:待測樣品用液相色譜-串聯四極桿質譜進行測定,儀器參數條件見表1,選擇反應監測母離子、子離子和碰撞能量見表2;
表1液相色譜-串聯四極桿質譜的儀器參數條件
表2選擇反應監測母離子、子離子、碰撞能量和掃描方式
(5)定性測定
在同樣測試條件下,試樣溶液中脂溶性貝類毒素的保留時間與標準物質保留時間相對偏差在±5%以內,且檢測到的定性離子的相對豐度,應與濃度相當的標準溶液中定性離子的相對豐度一致,基峰與次強碎片離子豐度比應符合表3要求;
表3基峰與次強碎片離子豐度比要求
??次強碎片離子相對豐度%??>50??>20~50??>10~20??≤10
??允許相對偏差%??±20??±25??±30??±50
(6)定量測定
將混合標準工作液和試樣溶液等體積進樣測定,按外標法使用標準工作曲線對樣品進行定量,試樣溶液和標準溶液中脂溶性貝類毒素的響應值均應在儀器檢測的線性范圍內。