[發(fā)明專利]海水中16種脂溶性貝類毒素的液質(zhì)聯(lián)用檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210388457.5
• 申請日: 2012-10-15
• 公開（公告）號: CN102928529A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚志軍;吳海燕;郭萌萌;李兆新;王聯(lián)珠;翟毓秀
• 申請（專利權(quán)）人: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種海水中16種脂溶性貝類毒素的液質(zhì)聯(lián)用檢測方法，包括吸附袋的制作、吸附袋的使用、毒素萃取、測定條件與方式、定性測定和定量測定，其特征在于具體步驟如下：

(1)吸附袋的制作：用聚酯網(wǎng)布，縫制成布袋，裝入樹脂之后密封，在正方形布袋的一角固定尼龍掛扣，把吸附袋在甲醇中浸泡，然后用蒸餾水浸泡去除甲醇，隨即放入密封的塑料袋中，在4℃條件下短時間保存，待用；

(2)吸附袋的使用：把吸附袋系在長繩上，分上、中、下三層，層間隔至少超過5米以上，否則相應(yīng)減少層數(shù)，每層一次固定3個及以上吸附袋，將繩系于固定位置的漂浮桿上，每間隔7-10天將吸附袋取出，再放入新的吸附袋，提取的吸附袋用蒸餾水沖洗，放入預(yù)先編號的塑料袋中，在4℃條件下短時間保存；

(3)毒素萃取：將樹脂填料轉(zhuǎn)入沙芯濾柱中，用50-70mL去離子水洗去鹽分，把柱中水份正壓吹干，加入20mL甲醇，濾入蒸發(fā)瓶中，再加入20mL甲醇重復(fù)提取一次，提取液在40℃使甲醇揮發(fā)，殘余1-2mL水，用5mL二氯甲烷萃取后離心，取出二氯甲烷層，再5mL二氯甲烷重復(fù)萃取一次，合并兩次二氯甲烷萃取層后用氮吹干，用1.0mL?80％的甲醇定容，以0.22μm的濾膜過濾，進(jìn)樣高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析；

(4)測定條件與方式：待測樣品用液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜進(jìn)行測定，儀器參數(shù)條件見表1，選擇反應(yīng)監(jiān)測母離子、子離子和碰撞能量見表2；

表1液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜的儀器參數(shù)條件

表2選擇反應(yīng)監(jiān)測母離子、子離子、碰撞能量和掃描方式

(5)定性測定

在同樣測試條件下，試樣溶液中脂溶性貝類毒素的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)保留時間相對偏差在±5％以內(nèi)，且檢測到的定性離子的相對豐度，應(yīng)與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液中定性離子的相對豐度一致，基峰與次強(qiáng)碎片離子豐度比應(yīng)符合表3要求；

表3基峰與次強(qiáng)碎片離子豐度比要求

??次強(qiáng)碎片離子相對豐度％??＞50??＞20～50??＞10～20??≤10??允許相對偏差％??±20??±25??±30??±50

(6)定量測定

將混合標(biāo)準(zhǔn)工作液和試樣溶液等體積進(jìn)樣測定，按外標(biāo)法使用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對樣品進(jìn)行定量，試樣溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液中脂溶性貝類毒素的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍內(nèi)。