[發明專利]一種鑒別奧利亞羅非魚、尼羅羅非魚及其雜交魚的方法有效
| 申請號： | 201210384347.1 | 申請日： | 2012-10-11 |
| 公開（公告）號： | CN102864241A | 公開（公告）日： | 2013-01-09 |
| 發明（設計）人： | 李建林;俞菊華;唐永凱;李紅霞;徐跑 | 申請（專利權）人： | 中國水產科學研究院淡水漁業研究中心 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 樓高潮 |
| 地址： | 214081 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 鑒別 奧利亞 羅非魚 羅羅 及其 雜交 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種鑒別奧利亞羅非魚、尼羅羅非魚及其雜交魚的方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）采集待鑒別的羅非魚樣品，提取基因組DNA；
（2）用步驟（1）獲得的基因組DNA為模板，進行PCR擴增；
（3）將步驟（2）獲得的PCR擴增產物進行電泳檢測；
（4）根據步驟（3）的電泳檢測結果，鑒別奧利亞羅非魚、尼羅羅非魚及奧利亞羅非魚和尼羅羅非魚雜交魚：尼羅羅非魚電泳檢測結果有1條178bp的條帶，奧利亞羅非魚有1條187bp的條帶，尼羅羅非魚和奧利亞羅非魚的雜交魚有2條條帶，分別為178bp和187bp。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（2）中，PCR擴增采用的正義引物序列為：5′AATAAAACAGTTGATGGTGA?3′，反義引物為：5′ˊ?AAATGAAGAAACGCCCTCTT?3′。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（2）中，PCR體系總體積20?μL，其中含10×反應緩沖液2?μL，Mg2+?2?mmol/L，dNTP 200μmol/L，上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.5U，DNA模板?100?ng～200?ng，用滅菌雙蒸餾水補足體積。
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