[發(fā)明專利]檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物miR-22及其用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210379896.X
• 申請日: 2012-10-09
• 公開（公告）號: CN102864237A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丁先鋒;紀婷;唐文杲;蔣理想;李彩霞
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江理工大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/113
• 代理公司: 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.一種檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物miR-22，其特征是miRNA序列為：

miR-22：aagcugccaguugaagaacugu。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物miR-22的用途，其特征是：制備用于篩查卵巢腫瘤或輔助卵巢腫瘤病理鑒定和臨床診斷的試劑盒。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征是：所述試劑盒包括反轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)和引物系統(tǒng)/引物探針系統(tǒng)；

所述反轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)包括反轉(zhuǎn)錄酶、反轉(zhuǎn)錄體系緩沖液和RNA酶抑制劑；

所述引物系統(tǒng)由miR-22的莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物、cDNA擴增引物以及miR-16的莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物、擴增引物組成；

所述引物探針系統(tǒng)由miR-22的莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物、cDNA擴增引物和探針以及miR-16的莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物、擴增引物和探針組成。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征是：所述試劑盒還包括擴增系統(tǒng)；所述擴增系統(tǒng)包括含Taq酶的miRNA表達定量檢測混合液。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征是：檢測該標(biāo)志物的技術(shù)為基于莖環(huán)的反轉(zhuǎn)錄-熒光定量PCR技術(shù)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征是：miR-22的莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物由以下核苷酸序列組成：

GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACACAGTT。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征是：所述熒光定量PCR為?DNA染料法或TaqMan探針法。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征是：miR-22的cDNA擴增引物為：

miR-22?PCR正向引物：CGGAAGCTGCCAGTTGAAGA；

miR-22?PCR反向引物：CAGTGCAGGGTCCGAGGTATT。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測卵巢腫瘤的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征是：miR-22的探針由以下核苷酸序列組成：

(6-FAM)TTCAGTTGAGTCAACATC(MGB)。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的血清學(xué)生物標(biāo)記物的用途，其特征在于：在熒光定量PCR檢測方法中，使用保守性miRNA的miR-16作為內(nèi)參照基因，其莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物、擴增引物和探針為：

序列：uauugcacuugucccggccugu；

莖環(huán)引物：CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGCGCCAATA；

PCR正向引物：ACACTCCAGCTGGGTAGCAGCACGTAAATA；

PCR反向引物：TGGTGTCGTGGAGTCG；

探針：(6-FAM)TTCAGTTGAGCGCCAATA(MGB)。