[發(fā)明專利]一種從板藍(lán)根中高效提取、分離和純化表告伊春的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210379452.6
• 申請(qǐng)日: 2012-10-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103113319A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付玉杰;羅猛;焦驕;蓋慶巖;魏福堯;李吉;彭霄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北林業(yè)大學(xué);付玉杰
• 主分類號(hào): C07D263/16
• 分類號(hào): C07D263/16
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.本發(fā)明涉及一種從板藍(lán)根中提取、分離和純化表告伊春的方法，其主要特征在于：以干燥的板藍(lán)根為原料，采用勻漿破碎酶解技術(shù)、酶輔助負(fù)壓空化提取技術(shù)，絮凝除雜技術(shù)，大孔吸附樹(shù)脂富集分離技術(shù)，溶劑抽提純化技術(shù)、正相硅膠中壓柱層析技術(shù)以及低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)等一系列高效提取、分離和純化技術(shù)手段得到純度達(dá)98%以上的表告伊春。

2.按照權(quán)利要求1所述的勻漿破碎酶解技術(shù)，其特征在于：使用的酶為纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶的混合酶，酶溶液濃度為250~500U/mL，通過(guò)檸檬酸緩沖液調(diào)節(jié)pH值至4.0~5.0，按液固比30:1~50:1與中藥材板藍(lán)根勻漿1~3min。

3.按照權(quán)利要求1所述的酶輔助負(fù)壓空化提取技術(shù)，其特征在于：將含有酶的勻漿液轉(zhuǎn)移入負(fù)壓空化提取裝置中，在溫度為35~45°C，壓力為0.07~0.09Mpa下，連續(xù)負(fù)壓空化提取，每次60~90min,提取1~3次。

4.按照權(quán)利要求1所述的絮凝除雜技術(shù)，其特征在于：提取液中加入95%的乙醇，充分?jǐn)嚢柚寥芤捍紳舛冗_(dá)65%左右，0~4°C冷藏12~24h，過(guò)濾，濾渣棄去，濾液濃縮至干得到固形物。

5.按照權(quán)利要求1所述的大孔吸附樹(shù)脂富集分離技術(shù)，其特征在于：所用樹(shù)脂包括D101，HPD100，AB-8和ADS-17廣譜非極性大孔吸附樹(shù)脂，所有大孔吸附樹(shù)脂均采用濕法裝柱，保留適當(dāng)液面，將醇沉后所得的固形物用蒸餾水溶解后，進(jìn)行大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，上樣量為0.5~1BV，流速為0.5~1BV/h，充分吸附后，用蒸餾水5~8BV充分洗去雜質(zhì)，10%乙醇10~15BV解吸目標(biāo)化合，合并解析液，濃縮至干得到固形物。

6.按照權(quán)利要求1所述的溶劑抽提純化技術(shù)，其特征在于：將得到的樹(shù)脂富集純化后的固形物加入蒸餾水溶解，以等體積的乙酸乙酯為萃取溶劑，萃取3~5次，減壓濃縮至干后得到富含表告伊春的粗品。

7.按照權(quán)利要求1所述的正相硅膠中壓柱層析技術(shù)，其特征在于：所用樣品為萃取后得到的粗品，所用層析硅膠為300~400目，所用有機(jī)試劑包括正己烷和乙酸乙酯，預(yù)先稱取質(zhì)量為樣品量8~10倍的層析硅膠，采用濕法裝柱，將樣品用少量乙酸乙酯溶解，加入與樣品量相同的層析硅膠拌勻后在水浴鍋上炒樣至干，然后裝入預(yù)先裝好的層析硅膠柱上，先后以10~20BV不同比例梯度的正己烷和乙酸乙酯溶液連續(xù)中壓洗脫，收集洗脫液，每份1/40~1/20BV，利用硅膠薄層層析(TLC)檢測(cè)洗脫液成分，合并相同部分，展開(kāi)劑為正己烷:乙酸乙酯=20:1~1:1。

8.按照權(quán)利要求1所述的低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)，其特征在于：所用溶劑為乙酸乙酯和甲醇，所用溶劑的比例為乙酸乙酯:甲醇=1:1~5，低溫析晶和重結(jié)晶的溫度為-10~25°C。?