[發明專利]一種基于活細胞矩陣技術的物質毒性的確定方法

無效

• 申請號: 201210372540.3
• 申請日: 2012-09-29
• 公開（公告）號: CN102925532A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 張效偉;蘇冠勇;夏潔;于紅霞
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;G01N21/64
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 蔣海軍

1.一種基于活細胞矩陣技術的物質毒性的確定方法，包括以下步驟：

（1）首先，測試環境毒物對大腸桿菌的生長抑制作用，在培養管或微孔板內接種相同密度的大腸桿菌，當細菌進入對數生長期時，根據細菌對環境毒物的耐受性，加入稀釋濃度的化合物、混合物、環境樣品的提取物或餾分并繪制S型曲線，求算環境毒物對細菌生長抑制的EC20；

（2）取出凍存于-80攝氏度的存有大腸桿菌的培養管或微孔板，在室溫下放置至其融化，迅速用復制觸角將其轉移復制入一塊裝有新鮮培養基的培養管或微孔板，培養細菌3個小時，此時，細菌進入對數生長期，將其分裝入多孔微孔板；

（3）選擇一個或多個測試濃度，在培養管或微孔板內快速加入受試環境毒物；

（4）將加過受試化合物的培養管或微孔板放入酶標儀，記錄報告基因信號在此后隨時間變化的情況。

2.根據權利要求1所述的一種基于活細胞矩陣技術的物質毒性的確定方法，其特征在于細菌進入對數生長期為當細菌吸光度OD600值達到0.1時。

3.根據權利要求1所述的一種基于活細胞矩陣技術的物質毒性的確定方法，其特征在于步驟（3）中0、0.01*EC20、0.1*EC20和EC20作為4個測試濃度。