[發明專利]一種H2納米結晶制劑及其制備方法

無效

• 申請號: 201210370987.7
• 申請日: 2012-09-28
• 公開（公告）號: CN102846554A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 張典瑞;田曉娜;沈月毛;賈樂姣;鄭丹丹;劉光璞
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K31/047;A61P35/00
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 彭成

技術領域

本發明涉及一種H2納米結晶制劑及其制備方法，屬于藥物制劑領域。

背景技術

DNA拓撲異構酶（topoisomerase）是廣泛存在于真核和原核生物體內的基本酶之一，調節NDA空間結構動態變化，參與DNA復制、轉錄、重組和修復等所生理過程，在細胞生命過程中起著重要的作用。以DNA拓撲異構酶為靶點的抗腫瘤藥物一直是抗腫瘤藥物研發的熱點之一。

H2是一種新合成的三聯苯衍生物，它是拓撲異構酶Ⅱ抑制劑，其結構式如下：

目前的研究表明，H2具有良好的抗腫瘤活性，有成藥前景，例如：H2作用于MDA-MB-435細胞的IC₅₀(μM)：0.39±0.03，顯示了很好的體外活性；用不同濃度H2(1.25μM、2.5μM、1.5μM、5μM、10μM)處理HCT116細胞12h，Western?Blot結果顯示，當濃度為10μM的時候，H2可以引起細胞內P53蛋白量上調，推測H2可能通過抑制拓撲異構酶調節相關基因表達,激活細胞內一系列導致細胞發生周期停滯和凋亡的過程,從而抑制腫瘤細胞生長。

H2具有良好的體外抗腫瘤活性，但是由于其水溶性差，限制了它的應用。隨著納米技術的發展，人們尋求用納米技術解決難溶性藥物溶解度低溶解慢的難題。上世紀90年代，一項新的固體藥物納米粒技術問世，即納米結晶混懸液技術。納米結晶是利用表面活性劑的穩定作用，將藥物顆粒分散在水中，通過粉碎或者控制析晶技術形成穩定的納米膠態分散體。體系中納米級粒徑的純藥物顆粒依靠表面活性劑的電荷效應或/和立體效應穩定地混懸在溶液中，其中藥物的平均粒徑小于1μm，一般在100～500nm之間。納米結晶可以進一步制備為適合口服、注射或其他給藥途徑的藥物劑型，從而提高藥物的吸收和生物利用度。而且納米結晶能提高制劑中的載藥量，特別適合大劑量、難溶性藥物的口服和注射給藥。此外，由于處方中不含載體和共溶劑，注射給藥的毒副作用較低。

納米結晶的制備方法主要有碾磨法、高壓勻質法、沉淀法、高壓均質法、乳化法和微乳法等。其中使用最多的為高壓均質法，均質操作,可以采用攪拌、超聲波、靜態混合器、膠體磨、高壓均質機等設備實現。但所有這些設備中,效果最好的高壓均質機,其均質后顆粒,也只能達到0.5微米左右。近年國外研制出一種微射流均質技術，實驗證明，用微射流均質設備所制備出的產品，不但其平均粒徑小，節省活化劑或穩定劑的用量，而且產品粒徑的均一性，分散性都非常好。微射流的工作原理是原料進入設備后，高壓泵即將其加壓至0.36-160MPa的高壓狀態，然后原料進入一個精密加工而成的微細通道內，在通道內原料的流速被增加到460米/秒的極高速度，繼而原料被引入到一個反應室內，在這里，原料首先被分成兩股或更多股的細流，形成以層流狀態流動的高速流體，并立即進入反應室的沖擊區內形成極為強烈的垂直對撞，就在這百萬之一秒內完成的對撞過程中釋放出其本身的大部分能量，產生90%的壓力差，這樣，就在這個沖擊區內，被處理物料內部產生了巨大的空化作用，并同時發生液體之間的剪切和相互撞擊作用而使液體顆粒高度破碎，實現了物料的均質乳化作用。

綜上，將H2制成納米結晶制劑，預期可以達到毒副作用小、體系穩定、可增加藥物的生物利用度等目的。現有技術中并未見有關于將H2制成納米結晶制劑的報道。在現有技術中缺乏相關報道的情況下，研制出一種具有療效好、生物相容性好、生物利用度高、體系穩定、適用于大規模工業生產、成本低等優點的H2納米結晶制劑無疑是困難的，需要付出創造性勞動，需要進行大量的試驗和條件篩選。

發明內容

針對上述現有技術，針對H2水溶性差的臨床應用局限性，本發明提供了一種H2納米結晶制劑，該制劑可以增加H2的生物利用度，且毒副作用小、體系穩定。本發明還提供了該H2納米結晶制劑的制備方法，該方法可采用常規的工藝設備，適合工業大規模高效益生產。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種H2納米結晶制劑，是以0.02g～2.0g的H2，0.01g～2.0g的表面活性劑，0.01g～0.6g的抗氧劑和凍干保護劑為原料，經以下制備方法制備得到的：

（1）將H2溶于有機溶劑中形成有機相；

（2）將表面活性劑和抗氧劑加入到100ml注射用水中，超聲使其分散均勻形成水相，置于0～3℃的冰浴中預冷；

（3）將有機相在氮氣保護并攪拌條件下逐滴滴加到預冷的水相中，繼續攪拌1.5～2.5h（優選2h），以盡量除去有機溶劑，得到混懸液A；