[發明專利]一種酯肽的制備方法

有效

• 申請號: 201210369972.9
• 申請日: 2012-09-28
• 公開（公告）號: CN103073619A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 陳友金;劉建;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳翰宇藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 深圳市深佳知識產權代理事務所(普通合伙) 44285
• 代理人: 唐華明

技術領域

本發明涉及化學合成肽領域，特別涉及一種酯肽的制備方法。?

背景技術

FK224是Fujisawa(Originator)研發的一種環肽類物質，動物體內試驗顯示其具有強大的NK-1和NK-2受體拮抗效應，對兩種受體的作用強度相似。但在用離體平滑肌進行的試驗中，其對NK-2受體的親和力比對NK-1受體低。臨床試驗表明:FK224可抑制由吸入緩激肽引起的哮喘支氣管收縮，但對NKA誘發的支氣管收縮則不起作用。?

FK224是一個七肽化合物，其結構如式Ⅰ所示：?

式Ⅰ。?

中國專利CN89102100中采用發酵的方法先得到WS9326A，然后通過還原的方法得到FK224。該方法用到的起始物料WS9326A必須經過發酵和多步純化才能得到，由于發酵過程是在有機體中進行的，所以產品中所含雜質的結構鑒定非常困難，且雜質的去除只能在純化階段，從而加大了純化的難度。而且由于發酵過程難于控制，因此，不利于工業化生產。?

發明內容

有鑒于此，本發明提供一種酯肽的制備方法。該方法具有定向合成的特點，對相關雜質的分析較發酵方法有更強的可溯性和可控性，且在合成階段可將相關雜質降低到一定的限度，降低了純化的難度和提高了產品的收率。本發明工藝的監測只需要通過簡單的Kaiser檢測，操作簡單，對設備要求不高。?

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：?

本發明提供了一種結構如式Ⅰ所示的酯肽的制備方法，包括如下步驟：?

步驟1：取羧基端具有第一保護基的Asp的側鏈羧基與氨基樹脂發生脫水縮合反應，獲得第一樹脂；?

步驟2：在第一樹脂的氨基端逐步偶聯allo-Thr，D-Phe，Leu，N-甲基-2,3-脫氫-Tyr，氨基端具有第二保護基、側鏈具有第三保護基的Thr，獲得第二樹脂；?

步驟3：取第一脫除劑去除第二樹脂中Thr的第三保護基，取Thr的側鏈羥基與氨基端具有第四保護基的Ser的羧基發生脫水反應，獲得第三樹脂；?

步驟4：取第二脫除劑去除第三樹脂中Asp的第一保護基，取所述第一脫除劑脫除第三樹脂中Ser的第四保護基，將Asp的羧基與Ser的氨基通過偶聯劑發生脫水縮合反應連接成環，獲得第四樹脂；?

步驟5：去除第四樹脂中Thr的第二保護基，將3-（2-戊基）-苯丙酸與Thr的氨基端發生脫水縮合反應，獲得肽樹脂；?

步驟6：取肽樹脂裂解、沉淀獲得粗肽，粗肽經純化后，即得；?

式Ⅰ。?

作為優選，本發明提供的一種結構如式Ⅰ所示的酯肽的制備方法中，第一保護基為OAll；第二保護基為Fmoc；第三保護基為trt；第四保護基為Trt。?

作為優選，本發明提供的一種結構如式Ⅰ所示的酯肽的制備方法中，allo-Thr的側鏈保護基為tBu。?

作為優選，本發明提供的一種結構如式Ⅰ所示的酯肽的制備方法中，N-甲基-2,3-脫氫-Tyr的側鏈保護基為Boc。?

作為優選，本發明提供的一種結構如式Ⅰ所示的酯肽的制備方法中，Ser的側鏈保護基為tBu。?

作為優選，氨基樹脂選自Rink?amide樹脂、Rink?amide?MBHA樹脂、Rink?amide-AM樹脂或Sieber樹脂。?

作為優選，氨基樹脂的替代度為0.1~1.0mmol/g。?

優選地，氨基樹脂的替代度為0.2~0.8mmol/g。?

更優選地，氨基樹脂的替代度為0.3~0.6mmol/g。?

作為優選，本發明提供的一種結構如式Ⅰ所示的酯肽的制備方法中，步驟3中第一脫除劑為TFA與DCM的混合溶液。?

優選地，TFA和DCM中TFA的體積比為1~10%，優選5%~10%。?

作為優選，第一脫除劑與第二樹脂混合后于常溫攪拌反應0.2~2h。?

作為優選，本發明提供的一種結構如式Ⅰ所示的酯肽的制備方法中，步驟4中第二脫除劑為Pd（Ph₃P）₄、苯硅烷和DCM的混合溶液。?

優選地，Pd（Ph₃P）₄、苯硅烷和DCM中Pd（Ph₃P）₄的摩爾用量為第一保護基的0.1~0.6倍；苯硅烷的摩爾用量為第一保護基的10~20倍。?

優選地，第二脫除劑與第三樹脂于常溫攪拌反應0.5~1h。?