[發明專利]一種鐵皮石斛組織培養一步成苗的方法

有效

• 申請號: 201210368914.4
• 申請日: 2012-09-27
• 公開（公告）號: CN102845308A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 沈曉霞;沈宇峰;王志安
• 申請（專利權）人: 浙江省中藥研究所有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 周烽

1.一種鐵皮石斛組織培養一步成苗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）制備成苗培養基：以B5為基礎培養基，每升B5培養基中添加0.1mg的6-芐氨基嘌呤、0.3mg的α-萘乙酸、2.0g的活性炭、3.5g的瓊脂和30g的蔗糖，加熱至沸騰，加熱過程中攪拌，待瓊脂完全溶解后，調節pH值至6.0，得成苗培養基；均勻地將成苗培養基分裝于培養容器中，邊分裝邊攪拌，避免活性炭沉底，分裝完畢后加蓋；培養容器加蓋后，放入高壓滅菌鍋內滅菌，滅菌條件為：121℃下滅菌20分鐘，滅菌后取出培養容器，冷卻后備用；

（2）鐵皮石斛果實滅菌：將鐵皮石斛果實放入水中清洗干凈；在無菌條件下，將鐵皮石斛果實在體積百分比濃度為75%的乙醇溶液中浸泡1分鐘，取出用無菌水清洗若干遍，放入體積百分比濃度為2%的次氯酸鈉溶液滅菌10分鐘，再用無菌水清洗若干遍，吸干水分后放入無菌培養皿中備用；

（3）接種：解開鐵皮石斛果實的果皮，把種子均勻地灑在成苗培養基表面，蓋緊蓋子；

（4）培養：將完成接種的培養容器移入培養室，培養條件為：溫度25℃，光照時間每天12小時，光照強度l500～2000lx，培養時間約為3個月，得到0.5-1.0?cm的幼苗；?

（5）轉接：首先配置壯苗培養基：每升B5培養基中添加0.5mg?的6-芐氨基嘌呤、1.0mg的α-萘乙酸、3.0g的活性炭、3.0g的瓊脂和30g的蔗糖，加熱至沸騰，加熱過程中攪拌，待瓊脂完全溶解后，調節pH值至6.0，得狀苗培養基；然后將幼苗轉接至壯苗培養基，繼續培養，直至苗高5-6cm時，移栽至大棚。