[發明專利]一種非侵入性精子形態和超微結構分析方法

無效

• 申請號: 201210368263.9
• 申請日: 2012-09-28
• 公開（公告）號: CN103698311A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 李錚;劉鋒;朱勇;何琳;劉宇飛
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 金重慶

1.一種非侵入性精子形態和超微結構分析方法，其特征在于，所述的精子形態和超微結構分析方法包括以下步驟：運用色散型共聚焦拉曼光譜儀進行分析，選擇激發拉曼光譜，將精子細胞置反射光鏡下中，通過一定的激發功率和曝光時間可采集到精子細胞的化學基團光譜；分別對精子頂體、頸部、尾部大小劃分掃描區域重復掃描三次，即可獲得拉曼數據譜峰，分析其波形變化和位移；最后將采集到的精子形態的拉曼光譜，應用RRUFF拉曼數據庫檢索，得到精子形態各區域的拉曼光譜。

2.根據權利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述的精子形態和超微結構分析方法包括以下步驟：

（1）選擇激光激發波長為532nm，激光功率5mW，激發拉曼光譜，曝光時間為10s；

（2）激光拉曼顯微鏡掃描參數：入射光調節為反射光，拉曼分析平移，即每個點掃描移動時，控制精度為1μm；

（3）根據精子形態分析標準，依據精子頂體、頸部、尾部大小，即頂體寬度3.1-3.5um，頂體長度為4.5-4.9um，頸部長度為4.0-5.0um劃分掃描區域：分別對精子頂體前區，即質膜定點掃描3個點；頂體中間，即DNA核區定點掃描4點；頂體后區，即赤道板部定點掃描3點；頸部，即線粒體區部定點掃描7點；尾部，即微管區域定點掃描8點，五個劃分區域共定點掃描23點進行掃描，并重復掃描三次，將獲得精子拉曼數據譜峰，分析其峰譜變化和位移。