[發(fā)明專利]一種植物表達載體及培育低植酸水稻的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210364073.X
• 申請日: 2012-09-26
• 公開（公告）號: CN102864167A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 舒慶堯;李文旭;趙海軍
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種RNAi抑制水稻MIK基因表達的植物表達載體，包括插入原始載體的發(fā)夾結(jié)構(gòu)單元和特異性啟動子，其特征在于，所述特異性啟動子為啟動子Oleosin?18，其核苷酸序列如SEQ?ID?No.2所示。

2.如權(quán)利要求1所述的植物表達載體，其特征在于，所述原始載體為pCAMBIA1301-35SN。

3.如權(quán)利要求1所述的植物表達載體，其特征在于，所述發(fā)夾結(jié)構(gòu)單元包括中間的內(nèi)含子及兩端的目的基因片段和目的基因片段的反向互補片段，所述內(nèi)含子的堿基序列如SEQ?ID?No.3所示。

4.如權(quán)利要求3所述的植物表達載體，其特征在于，所述MIK基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.8所示。

5.一種培育低植酸水稻的方法，其特征在于，包括：

(1)構(gòu)建如權(quán)利要求1～4任一所述的植物表達載體；

(2)將所述植物表達載體通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化水稻愈傷組織；

(3)將水稻愈傷組織轉(zhuǎn)移到選擇性培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，待分化成苗，移栽大田，篩選獲得低植酸水稻植株。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述植物表達載體的構(gòu)建方法為：

(1)構(gòu)建發(fā)夾結(jié)構(gòu)單元；

(2)將啟動子Oleosin?18替換原始載體的啟動子；

(3)將發(fā)夾結(jié)構(gòu)單元插入啟動子Oleosin?18的下游。

7.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述農(nóng)桿菌為根瘤農(nóng)桿菌EHA105。

8.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，將低植酸水稻植株種植多代，獲得性狀穩(wěn)定植株。