[發明專利]一種同時測定牛奶中單諾沙星與氟甲喹的熒光方法

有效

• 申請號: 201210363582.0
• 申請日: 2012-09-26
• 公開（公告）號: CN102879368A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 劉小鳴;陳衛;馮仕云;周鵬;范大明
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/28;G01N1/38
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 張水俤

1.一種同時測定牛奶中單諾沙星與氟甲喹的熒光方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）校正集樣本的收集：在不含單諾沙星與氟甲喹的牛奶樣本中加入不同量的單諾沙星與氟甲喹，使牛奶體系中單諾沙星的濃度在0-56μg?L^-1范圍內，氟甲喹的濃度在0-100μg?L^-1范圍內，加入三氯乙酸除去牛奶中蛋白質，收集澄清的校正集樣本。

（2）校正集樣本熒光光譜的測定：使用熒光分光光度計掃描樣本，獲取熒光光譜數據。

（3）校正模型的建立：利用多元校正化學計量學方法，分別構建校正集樣本中單諾沙星與氟甲喹含量與熒光光譜數據之間關系的數學模型，用于樣本單諾沙星與氟甲喹含量的預測并判斷出陰性與陽性樣品。

（4）校正模型的驗證：取已知單諾沙星與氟甲喹含量的牛奶驗證集樣本，在與步驟（2）中相同條件下掃描獲取熒光光譜數據，根據已建立的校正模型計算樣本中單諾沙星與氟甲喹含量以及對陰性與陽性樣本進行分類。

（5）校正模型的應用:采集待測樣本的熒光光譜數據，獲取特征光譜信息，將該光譜信息輸入已建立的校正模型中，篩選出陰性樣本并計算出牛奶樣本中單諾沙星與氟甲喹的含量。

2.根據權利要求1所述的一種同時測定牛奶中單諾沙星與氟甲喹的熒光方法，所述的步驟（1）中加入三氯乙酸除去牛奶中蛋白質的方法為加入濃度為50%（w/v）的三氯乙酸，至蛋白質沉淀，靜置5min，離心，過濾。

3.根據權利要求1所述的一種同時測定牛奶中單諾沙星與氟甲喹的熒光方法，所述的步驟（2）中熒光光譜數據的采集條件為：以320nm為激發波長，以330-530nm為發射波長范圍，以5nm為激發波長和發射波長的狹縫寬度，以1200nm/min為進行光譜掃描速度，每個樣本作3次平行掃描，取平均掃描數據作為樣本的熒光光譜數據。

4.根據權利要求1所述的一種同時測定牛奶中單諾沙星與氟甲喹的熒光方法，所述的多元校正化學計量學方法為偏最小二乘法判別分析（PLS-DA）和偏最小二乘法（PLS），使用的計算機軟件為Unscrambler軟件。

5.根據權利要求1所述的一種同時測定牛奶中單諾沙星與氟甲喹的熒光方法，所述的陰性牛奶樣本為牛奶體系中單諾沙星含量小于最大殘留量30μg?L^-1、氟甲喹含量小于最大殘留量50μg?L^-1的樣本；所述的陽性樣本為牛奶體系中單諾沙星含量大于最大殘留量30μg?L^-1、氟甲喹含量大于最大殘留量50μg?L^-1的樣本。