[發(fā)明專利]低密度脂蛋白膽固醇定量法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210362275.0 | 申請日: | 2009-03-06 |
| 公開(公告)號: | CN103060426A | 公開(公告)日: | 2013-04-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 孫國敬 | 申請(專利權(quán))人: | 北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/60 | 分類號: | C12Q1/60;C12Q1/44;C12Q1/28;C12Q1/26 |
| 代理公司: | 北京戈程知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314 | 代理人: | 程偉 |
| 地址: | 100083 北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 密度 脂蛋白 膽固醇 定量 | ||
1.一種測定樣品中低密度脂蛋白膽固醇的含量的方法,其步驟為:
1)用優(yōu)化比例和濃度的聚乙烯硫酸三鉀和聚乙二醇獨甲醚與所述的樣品接觸,所述的聚乙烯硫酸三鉀和聚乙二醇獨甲醚的優(yōu)化比例為1:400-500,所述的優(yōu)化濃度分別為10-20mg/L和4g-10g/L;
2)在不形成沉淀的條件下聯(lián)合至少一種表面活性劑通過酶法測定所述樣品中低密度脂蛋白膽固醇的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述的至少一種表面活性劑為第一表面活性劑和第二表面活性劑的組合,所述第一表面活性劑選自聚氧乙烯高級醇醚、聚氧乙烯月桂基醚、聚氧乙烯十六烷基醚、聚氧乙烯油基醚、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯亞烷基苯基醚、聚氧乙烯亞烷基三苯基醚或聚氧乙烯烷基醚硫酸鹽;所述第二表面活性劑選自Triton?X100、聚氧乙烯-聚氧丙烯的縮合物Pluronic?L121、Pluronic?L123、Pluronic?L101、Pluronic?L108、PluronicF68、Tween?20、lipomin?LA、Anhitol?24B或膽酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,進(jìn)一步加入0.1mM-2mM的能掩蔽二價陽離子的金屬螯合劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其中所述的金屬螯合劑為EDTA或EGTA。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,酶反應(yīng)所產(chǎn)生的過氧化氫無需過氧化物酶或過氧化氫酶去除,從而不需要加入疊氮鈉。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其中所述的第二表面活性劑與脂蛋白反應(yīng)或至少與低密度脂蛋白反應(yīng)。
7.用于檢測低密度脂蛋白膽固醇含量的試劑盒,其包括試劑1和試劑2,其中
-試劑1包括10-20mg/L聚乙烯硫酸三鉀、4-10g/L聚乙二醇獨甲醚、0.1-5mM?EDTA、1-10KU/L膽固醇酯酶、5-20KU/L膽固醇氧化酶、0.1-1%w/v的至少一種選自聚氧乙烯高級醇醚、聚氧乙烯月桂基醚、聚氧乙烯十六烷基醚、聚氧乙烯油基醚、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯亞烷基苯基醚、聚氧乙烯亞烷基三苯基醚或聚氧乙烯烷基醚硫酸鹽的第一表面活性劑;
-試劑2包括10-30KU/L過氧化物酶、0.1-1%w/v的至少一種選自Triton?X100、聚氧乙烯-聚氧丙烯的縮合物Pluronic?L121、PluronicL123、Pluronic?L101、Pluronic?L108、Pluronic?F68、Tween?20、lipominLA、Anhitol?24B或膽酸的第二表面活性劑;和
-說明書。
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