[發(fā)明專利]一種泡騰片式低分子量膠原蛋白肽及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210361765.9
• 申請日: 2012-09-24
• 公開（公告）號: CN102888436A
• 公開（公告）日: 2013-01-23
• 發(fā)明（設計）人: 朱宏吉;張華;王世鵬;滕欣余;路明月;姜珊;方潔;張鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 天津大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K4/12;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;A61K8/97;A61K8/65;A61K8/02;A61Q19/00
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 王秀奎

1.一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法，其特征在于，按照下述步驟進行：?

步驟1，除去豬皮中非膠原性蛋白質(zhì)，其中用0.1mol/l~0.15mol/lNaOH水溶液浸泡原料豬皮，料液比為1:25~1:30，以除去豬皮里非膠原性蛋白質(zhì)?

步驟2，脫除豬皮中的脂肪，其中按料液比為1:25~1:30的比例取水，然后加入占原料豬皮質(zhì)量2%~4%的脂肪酶，調(diào)整溫度和體系的pH值以使加入的脂肪酶活性達到最大，脫除脂肪?

步驟3，溶膠，其中將脫去脂肪的豬皮置于水中，料液比1:15~1:20,80℃的條件下恒溫加熱，低速100-200轉(zhuǎn)/min攪拌4h~6h，得到豬皮和水溶性膠原的混合物?

步驟4，制備胰蛋白酶酶解蛋白肽溶液，將上一步的豬皮和水溶性膠原的混合物降溫，同時調(diào)節(jié)混合物溶液的pH值以使加入的胰蛋白酶活性達到最大，加入胰蛋白酶，E/[S]=1000~2500u/g，然后將酶解后的蛋白肽液滅酶活，離心除去不溶物，得到胰蛋白酶酶解蛋白肽液?

步驟5，蛋白肽液脫色，配置2wt%~4wt%的硅藻土的水溶液，抽濾，使濾紙表面形成一層均勻的硅藻土層，以此為過濾介質(zhì)，對蛋白肽液抽濾，抽濾后的蛋白肽液進入樹脂柱進行分離，得到澄清透明的膠原蛋白肽液?

步驟6，濃縮干燥，將澄清透明的膠原蛋白肽液進行真空濃縮和噴霧干燥得膠原蛋白肽粉末。?

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法，其特征在于，在所述步驟2中，使用Na₂CO₃粉末調(diào)節(jié)pH值為9～9.3，35℃恒溫低速100-200轉(zhuǎn)/min攪拌8h~10h，脫除豬皮中的脂肪。?

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法，其特征在于，在所述步驟4中，將上一步的豬皮和水溶性膠原的混合物降溫至50℃,保持50℃恒溫，調(diào)節(jié)混合物溶液的pH=7，加入胰蛋白酶，低速100-200轉(zhuǎn)/min攪拌18h-24h，將酶解后的蛋白肽液置于95℃的環(huán)境下5-10min，以滅酶活。?

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法，其特征在于，在所述步驟5中，所述樹脂柱為D296R型樹脂柱，控制抽濾后的蛋白肽液流速為以2ml/min~6ml/min的流速進入D296R型樹脂柱，得到澄清透明的膠原蛋白肽液。?

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低分子量膠原蛋白肽的提取方法，其特征在于，在所述步驟6中，在真空濃縮階段，待體系中出現(xiàn)固形物且固形物質(zhì)量分數(shù)達到整個澄清透?明的膠原蛋白肽液體系的30%~35%時停止?jié)饪s，并進行噴霧干燥。?

6.一種利用本發(fā)明制備的低分子量膠原蛋白肽粉末的泡騰片式低分子膠原蛋白肽，其特征在于，按質(zhì)量份計，由以下組分組成：?

其中所述組分A為5%PVP70%乙醇，稱5gPVP，加入70wt%乙醇的水溶液至100g，攪拌溶解混勻即可。?

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的泡騰片式低分子膠原蛋白肽，其特征在于，各組分優(yōu)選如下：?

。

8.一種制備如權(quán)利要求6所述的泡騰片式低分子膠原蛋白肽的方法，其特征在于，按照下述步驟進行：?

將低分子量膠原蛋白肽、蘆薈、檸檬酸分別研磨成細粉，過20目篩網(wǎng)，混合均勻后加入組份A后造粒，4045℃真空干燥，得到第一顆粒①；將低分子量膠原蛋白肽、蘆薈、碳酸氫鈉分別研磨成細粉，過20目篩網(wǎng)，混合均勻后加入組份A后造粒，40-45℃真空干燥，得到第二顆粒②；然后將甘露醇，山梨醇，聚乙二醇6000混勻，過80目篩，加入上述第一和第二顆粒①②,混合均勻，迅速轉(zhuǎn)移至溫度(20±2)℃、濕度(40±5)%?無菌操作間中進行壓片制得產(chǎn)品。?

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種泡騰片式低分子膠原蛋白肽的方法，其特征在于，所述甘露醇，山梨醇，聚乙二醇6000三者均為粉末狀固體。?

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種泡騰片式低分子膠原蛋白肽的方法，其特征在于，在制備第一顆粒和第二顆粒時，優(yōu)選在44℃真空干燥；在制備第一顆粒和第二顆粒時，可選擇將低分子量膠原蛋白肽、蘆薈和組分A等用量地分配在第一顆粒和第二顆粒中。?