[發明專利]一種角質酶的分離純化方法

無效

• 申請號: 201210361503.2
• 申請日: 2012-09-26
• 公開（公告）號: CN102839163A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 王秀英
• 申請（專利權）人: 四川金稞生物科技有限公司
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12R1/77;C12R1/66;C12R1/645
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技術領域

本發明涉及一種以疏水色譜和陰離子交換為主要手段角質酶的分離純化方法，屬于生物技術分離純化領域。

背景技術

角質酶(Cutinase，EC3.1.1.74)是一種能破壞角質多聚物分子的酯鍵使其水解為單體和小分子寡聚體的胞外誘導水解酶，它主要存在于植物病原菌中，是病原菌侵入植物時用以突破植物表皮第一道屏障角質所需要的酶。角質酶屬于a/β水解酶家族，可降解不溶性甘油三酯、可溶性酯和角質等聚酯，它作為一種多功能水解酶，在食品及化工等諸多領域都具有廣泛的應用。角質酶既可水解不溶性多聚體角質的酯鍵，也可以作用于其他長鏈、短鏈脂肪酸酯、乳化的甘油三酯等。除了水解反應外，角質酶還能參與酸與醇的酯化。作為一種能裂解酶，角質酶主要應用在以下幾個方面：

1、在生物催化方面的應用

在工業產品及工藝中，角質酶具有獨特的應用優勢。從可溶性合成酯類到不溶性長鏈甘油的多種酯，角質酶對其均有水解作用，角質酶可在較低水分活度下進行脂肪和油的專酯化或醇類的(立體)選擇性酯化；可進行丁酸和2-丁醇、甲基-、乙基-、丙基丙酸酯等物質之間的酯化、專酯化反應，也可參與合成聚合物表面活性劑及含有一個或多個手性中心的藥物。

2、在農業化學品工業中的應用

大量性質不同的化合物，例如除草劑、殺蟲劑和植物生物物質等，沉積或吸附在植物表面，它們對植物的作用很大程度取決其通過角質層的能力。根據這一特點，人們研究了含有角質酶的制劑，開發用于農用化學品的增效劑及輔劑、植物防御反應的誘導物、除草劑及植物生長的抑制劑等。

3、在護理用品行業的應用

由于角質酶具有脂肪酶的性能，已被用作洗衣店的解脂肪酶或洗碟的清潔劑，用于去除脂肪。角質酶及其采用酶工程獲得的變體已經開發用于生產清潔劑或去污劑，聯合利華等公司擁有其相關專利。

4、在食品工業和農產品深加工中的應用

角質酶在乳制品工業中牛奶脂肪的水解，以及油化學工業中具有應用潛力；可用于低附加值的農副產品加工廢物轉化成有價值的脂肪酸等物質。

5、在塑料廢物的生物降解和廢水處理方面的應用

每年全球大約產生140，000，000t的合成塑料，這些合成塑料大都性質穩定，對環境造成的污染已經成為環境保護所面臨的一大問題。聚己內酯(polylcaprolactone，PCL)是其中一種合成聚酯，有研究發現它可被一些植物病原真菌降解。Murphy等人研究證實植物病原真菌茄病鐮刀菌降解聚己內酯過程中發揮作用的正是角質酶，因此，在PCL生物降解方面，人們對角質酶的用途有了新的認識。此外，Teles等人應用角質酶對皮革工業的固體廢物進行了脫脂研究。

6、在紡織工業中的應用