[發(fā)明專利]一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210361344.6
• 申請(qǐng)日: 2012-09-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102841155A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮文宇;崔瑩;周巖;吳濤;謝丹;尤楠;唐奎山;尹宏;婁玉濤;周秀峰;孟濤;劉志清
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北制藥集團(tuán)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 沈陽(yáng)維特專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 21229
• 代理人: 甄玉荃

1.一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：所述方法包括如下步驟：

（1）色譜條件

色譜柱為氨基-丙基硅烷鍵合的硅膠柱，檢測(cè)器為示差折光檢測(cè)器，流動(dòng)相為正磷酸鹽水溶液；

（2）對(duì)照品溶液的制備

取磷霉素鈉標(biāo)準(zhǔn)品用流動(dòng)相配制成磷霉素鈉的對(duì)照品溶液；

（3）參照溶液一的制備

（a）用水濕潤(rùn)的磷霉素鈉原料，在烘箱中進(jìn)行加熱，得到磷霉素鈉殘?jiān)瑲堅(jiān)泻s質(zhì)A，用適量流動(dòng)相溶解所述殘?jiān)玫綒堅(jiān)芤海唬╞）取磷霉素鈉原料溶于適量所述殘?jiān)芤褐械玫絽⒄杖芤阂唬?/p>

（4）供試品溶液的制備

取磷霉素鈉原料用流動(dòng)相配制成供試品溶液；

（5）參照溶液二的制備

將供試品溶液用流動(dòng)相進(jìn)行稀釋，得到參照溶液二；

（6）測(cè)定方法

取參照溶液一注入高效液相色譜儀，記錄譜圖，計(jì)算磷霉素峰與雜質(zhì)A峰的分離度應(yīng)大于或等于1.5；取對(duì)照品溶液，平行進(jìn)樣，注入高效液相色譜儀，記錄譜圖，計(jì)算磷霉素峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)小于或等于0.85%；取供試品溶液、參照溶液二分別注入高效液相色譜儀，記錄譜圖，計(jì)算供試品溶液中雜質(zhì)的峰面積。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：在步驟（1）中，所述的氨基-丙基硅烷鍵合的硅膠柱為Zorbax-NH2柱；所述檢測(cè)器的溫度為30-40℃，優(yōu)選溫度為35℃；所述正磷酸鹽選自磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀中的一種或幾種，優(yōu)選磷酸二氫鉀；所述正磷酸鹽水溶液的濃度為0.05-0.12mol/l，優(yōu)選0.08mol/l。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：在步驟（2）中，所述對(duì)照品溶液中磷霉素鈉的濃度為0.06-0.24g/ml，優(yōu)選0.12g/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：在步驟（3）中的步驟（a）中，所述烘箱加熱的溫度為50-70℃，優(yōu)選溫度60℃；所述加熱的時(shí)間為16-30小時(shí)，優(yōu)選時(shí)間為24小時(shí)；所述殘?jiān)芤簽槊?00ml含有將1-2g所述磷霉素鈉原料加熱所得殘?jiān)臍堅(jiān)芤海瑑?yōu)選每100ml含有將1.5g所述磷霉素鈉原料加熱所得殘?jiān)臍堅(jiān)芤海辉诓襟E（3）中的步驟（b）中，所述參照溶液一為每10ml含有溶于所述殘?jiān)芤褐械牧酌顾剽c原料0.6-2.4g，優(yōu)選每10ml含有溶于所述殘?jiān)芤褐械牧酌顾剽c原料1.2g。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：在步驟（4）中，所述供試品溶液中磷霉素鈉的濃度為0.06-0.24g/ml，優(yōu)選磷霉素鈉的濃度為0.12g/ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：在步驟（5）中，每200ml所述參照溶液二含有0.5-1.5ml所述供試品溶液，優(yōu)選每200ml所述參照溶液二含有1ml所述供試品溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：在步驟（6）中，所述參照溶液一、對(duì)照品溶液、供試品溶液、參照溶液二的進(jìn)樣體積為3-20μl，優(yōu)選進(jìn)樣體積為10μl；所述雜質(zhì)為雜質(zhì)A、非特定雜質(zhì)及總雜質(zhì)。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：所述的正磷酸鹽水溶液的配制方法為將適量所述正磷酸鹽置于水中溶解，過(guò)濾，超聲。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用高效液相色譜檢測(cè)磷霉素鈉中有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于：所述的雜質(zhì)A為（1,2-二羥基丙基）膦酸。