[發(fā)明專利]雙液相系統(tǒng)發(fā)酵法降解植物甾醇制備雄烯二酮

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210360968.6
• 申請日: 2012-09-26
• 公開（公告）號: CN103255191A
• 公開（公告）日: 2013-08-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊旭錦;石慧
• 申請（專利權(quán)）人: 北京明新高科技發(fā)展有限公司
• 主分類號: C12P33/02
• 分類號: C12P33/02;C12R1/32
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.本發(fā)明涉及一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮(雄甾-4-烯-3，17-雙酮，簡稱AD)的方法，其具體步驟如下：發(fā)酵菌種接種至雙液相培養(yǎng)基中，保持一定的溫度，加入植物甾醇，攪拌、控制pH值，發(fā)酵完成后，采用膜分離技術(shù)獲得含AD溶液，后經(jīng)濃縮、活性炭脫色、過濾、濃縮、重結(jié)晶、真空干燥得到AD晶體，純度達(dá)到99％以上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于發(fā)酵菌種為分枝桿菌(Mycobacterium?sp.)DE6823，其菌種保藏編號為CGMCC?No.6419。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于雙液相指的是水相和油相；水相具體為滅菌蒸餾水，油相具體可是米糠油、葵花油、大豆油和花生油。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于菌種的接入量為8％～17％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于培養(yǎng)基配方如下：玉米淀粉4～17％(g/L)，NH₄NO₃?0.1～0.4％(g/L)，K₂HPO₃?0.1～0.2％(g/L)，航空煤油0.1～0.5％(g/L)，消泡劑0.002～0.009％(g/L)，油相的濃度為14～26g/L，植物甾醇的添加濃度維持15～22g/L，其余為滅菌蒸餾水。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于保持一定溫度為30℃～32℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于攪拌速度為130～300r/min；pH值范圍為8.2～8.4。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于有機(jī)溶劑指的是烷基醇和烷基酮，具體包括乙醇、甲醇、異丁醇、丙酮。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于發(fā)酵結(jié)束后，過濾，濾去發(fā)酵液中的固體，加入少量的無機(jī)鹽，取油相，加入權(quán)利要求8所述溶劑，充分?jǐn)嚢韬?，通過膜過濾，濃縮，在濃縮液中加入活性炭，回流10～20min，過濾、濾液旋蒸得到AD粗品。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種利用微生物發(fā)酵降解植物甾醇制備雄烯二酮，其特征在于無機(jī)鹽指的是NaCl、K₂CO₃和Na₂CO₃。